甲醛滴定法测定氨基氮
一. 目的
初步掌握甲醛滴定法测定氨基氮含量的原理和操作要点。
二. 原理
氨基酸是两性电解质，在水溶液中有平衡
如样品为一种已知的氨基酸，从甲醛滴定的结果可算出氨基氮的含量。如样品为多种氨基酸的混合物如蛋白质水解液，则滴定结果不能作为氨基酸的定量依据。但此法简便快速，常用来测定蛋白质的水解程度，随水解程度的增加滴定值也增加，滴定值不再增加时，表明水解作用已完全。
三. 仪器、试剂、材料
1. 仪器
25ml锥形瓶；3ml微量滴定管；吸管；研钵。
2. 试剂
(1) 300ml 0.05mol/L标准甘氨酸溶液
准确称取375mg 甘氨酸，溶解后定容**100ml。 (2) 500ml 0.02mol/L标准氢氧化钠溶液 (3) 20ml酚酞指示剂
0.5 ％酚酞的50 ％乙醇溶液 (4) 400 ml中性甲醛溶液
在50ml 36－37 ％分析纯甲醛溶液中加入1ml 0.5％酚酞乙醇水溶液，用0.02mol/L的氢氧化钠溶液滴定到微红，贮于密闭的玻璃瓶中。四. 操作方法
1. 取3个25 ml的锥形瓶，编号。向1、2号瓶内各加入0.05mol/L标准甘氨酸溶液
2ml和水5ml，混匀。向3号瓶内加入7 ml水。然后向三个瓶中各加入5滴酚酞指示剂，混匀后各加2 ml甲醛溶液再混匀，分别用0.02mol/L标准氢氧化钠溶液滴定**溶液显微红色。 重复以上实验两次，记录每次每瓶消耗的标准氢氧化钠溶液的毫升数。取平均值，计算甘氨酸氨基氮的回收率。
2. 取未知浓度的甘氨酸溶液2ml，依上述方法进行测定，平行做几份，取平均值。计
算每毫升甘氨酸溶液中含有氨基氮的毫克数。
五. 结果处理
1. 回收率计算：
六. 注意事项
1. 标准氢氧化钠溶液应在使用前标定，并在密闭瓶中保存。不可使用隔日贮在微量滴
定管中的剩余氢氧化钠。
2. 中性甲醛溶液在临用前配制，若已放置一段时间，则使用前需要重新中和。
3. 本实验为定量实验，甘氨酸和氢氧化钠的浓度要严格标定，加量要准确，全部操作
要按分析化学要求进行。
4. 脯氨酸与甲醛作用生成不稳定的化合物，使滴定毫升数偏低。而酪氨酸的滴定毫升
数结果偏高。