碱裂解法制备质粒dna时，溶液1，2，3中各组分都起什么作用

Question

如题所述

Answer 1

加入溶液1的目的主要是将细菌团块重新溶解于缓冲液中；溶液2含有SDS及NaOH，前者可将细菌溶解，后者可将DNA变性；溶液3是由醋酸和钾盐组成，前者在于中和碱性，后者则有利于染色体DNA的沉淀。

高pH使质粒DNA和染色体DNA变性，同时沉淀蛋白质。再将pH值调至中性，质粒DNA较小，很容易复性成双链。而染色体DNA较大，不会复性，缠结成网状不溶物质，从而可以通过离心除去。

扩展资料：

尽管碱性溶剂使碱基配对完全破坏，闭环的质粒DNA双链仍不会彼此分离，这因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。

只要OH-处理的强度和时间不要太过，当pH值恢复到中性时，DNA双链就会再次形成。在裂解过程中，细菌蛋白质、破裂的细胞壁和变性的染色体DNA会相互缠绕成大型复合物，后者被十二烷基硫酸盐包盖。

参考资料来源：百度百科-质粒抽提

Answer 2

加入溶液1的目的主要是将细菌团块重新溶解于缓冲液中；溶液2含有SDS及NaOH，前者可将细菌溶解，后者可将DNA变性；溶液3是由醋酸和钾盐组成，前者在于中和碱性，后者则有利于染色体DNA的沉淀

Answer 3

环状的质粒dna，因为只有环状的才是环状双螺旋结构，在碱裂的时候线状的基因组dna氢键破坏，双螺旋解开。而环状的质粒虽然有部分氢键被打开，但是环状结构仍保持，从而碱裂解后能跑电泳分离出来。

Answer 4

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