该法是将已熔化并冷却至约50℃(减少冷凝水)的琼脂培养基,先倒入无菌培养皿中,制成无菌平板。待充分冷却凝固后,将一定量(约0.1 ml)的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面,再用三角形无菌玻璃涂棒涂布,使菌液均匀分散在整个平板表面,倒置温箱培养后挑取单个菌落。
计数时,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表一个细胞),再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。
微生物平板涂布法有以下注意事项:
1、整个过程需要保证在无菌条件下进行。试管、枪头等仪器设备都需要提前经过灭菌环节才可以使用。
2、接种环使用前应当在酒精灯上灼烧至红热,以保证灼烧充分。
3、蘸取少量菌液,先在培养皿上划第一条,注意不要转动接种环。
4、在稀释过程中要充分混匀,吸取100ul到平板上,然后用烧好的涂布棒均匀涂抹开,各个方向都可以涂布,涂布完灼烧。