Taqman探针为基础的Real-time PCR以引物和探针序列决定反应的特异性,而通过荧光强度判断探针降解程度,从而推断模板量.
传统PCR通过琼脂糖凝胶电泳判断产物量,达到半定量的目的.由于EB等染色剂与较长片段DNA结合后才能显现可测量的荧光,因而往往产物大小为150-1000 bp.Real-time PCR通过反应中得到的荧光强度/循环数的比例关系得出结果,因而不需要加长产物.
产物长度短还能够简化热循环反应条件,减少反应时间.当然在条件允许的情况下,尽量增长产物长度（
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