碱法提取质粒中，基因组dna和蛋白质怎样被去除，其原理何在

如题所述

推荐答案 2017-03-24

现质粒提取论手提试剂盒其根本原理碱裂解:菌体NaOH SDS溶液裂解蛋白质与DNA发变性加入液质粒DNA能够迅速复性呈溶解状态离留清;蛋白质与染色体DNA变性呈絮状离沉淀进步质粒DNA获取手提经苯酚、氯仿抽提RNA酶消化乙醇沉淀等简单步骤除残余蛋白质RNA及盐试剂盒则基础使用DNA吸附柱吸附质粒DNA洗脱质粒评价:一通琼脂糖电泳检查所获质粒(准确需酶切)细菌基组DNARNA污染及质粒断裂少同根据marke量品进行致浓度定量; 二通紫外光光度计测定品OD二吧0OD二陆0计算其比值衡量品纯度经验值:纯DNA:OD二陆0/OD二吧0≈一.吧(＞一.9,表明RNA污染;＜一陆表明蛋白质、酚等污染)同用紫外光光度计其进行精确浓度定量除蛋白质:所言提取质粒程部蛋白质碱裂解形沉淀除;更能形沉淀蛋白质用酚/氯仿/异戊醇进行抽提程除若疑问欢迎继续讨论祝愉快

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碱裂解法提取质粒dna的原理是什么?答：碱裂解法提取质粒dna的原理是：高PH的溶液会使细胞壁粕类从而使得DNA和蛋白质变性。将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中，会使细胞壁破裂，染色体DNA和蛋白质变性，将质粒DNA释放到上清中。尽管碱性溶剂使碱基配对完全破坏，闭环的质粒DNA双链仍不会彼此分离，这因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。

碱变性法提取质粒dna的原理及过程答：过程如下：1、将含有目标质粒的细菌或真核细胞进行裂解，释放细胞内的DNA。这可以通过机械方法（如超声波处理）或化学方法（如洗涤剂溶解）来实现。2、将裂解后的细胞溶液加入高pH（常为12.6）的碱性溶液中。在碱性条件下，DNA的双螺旋结构会解开，变性为单链DNA。在这个过程中，质粒DNA的超螺旋结构会...

碱裂解法提取质粒dna的原理是什么?答：其基本原理为：当菌体在NaOH 和SDS 溶液中裂解时，蛋白质与DNA 发生变性，当加入中和液后，质粒 DNA 分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA 不变性而呈絮状，离心时可沉淀下来。相关介绍：细菌质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1kb 至200kb 以上不等。各种质粒都...

提取质粒时这样去除基因组总DNA答：用碱裂解法提质粒，基因组DNA会与细胞残骸聚集，而小的质粒DNA溶在水相中，通过离心就能除去；如果还担心有少量基因组DNA污染，可以电泳后从胶中回收质粒片段；用核酸外切酶也能消化掉线性的DNA，而环形和超螺旋的质粒DNA则得以保留。

碱法分离质粒DNA的原理是什么?答：去除蛋白质：如上所言，提取质粒过程中，一部分蛋白质会在碱裂解法中形成沉淀，得以去除；还有更多不能形成沉淀的蛋白质在用酚/氯仿/异戊醇进行抽提的过程中被去除。若有疑问，欢迎继续讨论，祝愉快！参考资料：http://wenku.baidu.com/view/67d818966bec0975f465e29b.html ...

碱裂解法提取质粒答：碱裂解法提取质粒的方法如下：一、实验原理：碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA 与线性染色体DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在pH 值介于12.0 ～12.5 这个狭窄的范围内，线性的DNA 双螺旋结构解开而被变性，尽管在这样的条件下，共价闭环质粒DNA 的氢键会被断裂，但两条互补链彼此相互盘绕...

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