真核细胞转化中,外源(重组)基因都是要先整合到真核细胞的染色体上,然后才会表达。也就是说,外源基因的转录过程也是在细胞核中完成的。
例如最常用的酵母表达系统,导入酵母体内的重组表达载体只有和酵母染色体上的同源区发生重组(同源区等等都是载体上预先设计好的),整合到染色体上,外源基因才能够稳定存在,外源蛋白才能得到稳定表达,这种整合的转化子一旦形成就非常稳定。如果转化后的重组表达载体未能整合到染色体上,而是以游离的附加体形式存在,这种转化子就不稳定,重组表达载体极易丢失。所以,载体必须整合入酵母基因组中才能实现异源蛋白的稳定表达。
又如农杆菌介导的植物转化,也是将表达载体的T-DNA左右边界间的外源序列稳定整合(插入)植物的染色体后,才能有效表达获得稳定的转基因植物。
具体机制说起来太复杂了,你可以自己找本分子克隆等书籍看看。
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