外源基因在哺乳动物细胞中表达的载体系统可分成几类?简述其主要特点及用途。

Question

如题所述

Answer 1

【答案】：哺乳动物细胞中并不携带相当于细菌质粒的附加体DNA，因此通常应用来自DNA病毒或RNA病毒基因作为载体。目前常用的动物病毒表达载体系统大体上可分为以下两类。
一类是整合型(integrated)，为稳定表达载体系统。即外源基因通过这种病毒载体与宿主细胞的染色体整合，外源基因随宿主细胞基因组的复制而扩增，这类载体的代表是pSV。它们主要被用于：(1)高水平组成型蛋白质的表达；(2)疫苗的生产；(3)利用痘苗病毒表达载体或可诱导的启动子-载体系统高水平地表达具有潜在毒性的外源基因。
另一类为游离型(transient)或称病毒颗粒型，为短暂表达载体系统。这类载体携带外源基因后，本质上仍然是一种完整或缺损的病毒，能够以病毒颗粒的形式在宿主细胞内自行复制或在辅助病毒存在下进行复制。常见的这类载体系统为痘苗病毒，腺病毒，杆状病毒及逆转录病毒等。
它们的主要用途是：(1)快速鉴定cDNA克隆；(2)快速研究人工突变对基因活性及蛋白质功能的影响；(3)根据在细胞中表达活性的能力，从构建在哺乳动物细胞表达载体上的cDNA文库中分离基因。