western blot 转移缓冲液的配方?

查了资料,发现有些配方和我现在做的有差别,怀疑影响了我的实验效果~~ 转移缓冲液是不是可以和电泳缓冲液共用的呢在不加甲醇的情况下? 麻烦把你们的配方共享一下!谢谢! 我现在用的配方如下:Tris-甘氨酸电泳缓冲液:30.3gTris,188g甘氨酸,10gSDS,用蒸馏水溶解至1000ml,得0.25mol/L Tris-1.92mol/L甘氨酸电极缓冲液。临用前稀释10倍。
转移缓冲液:配制1L转移缓冲液,需称取2.9g甘氨酸、5.8gTris碱、0.37g SDS,并加入200ml甲醇,加水至总量1L
实验结果不是那么好,不知道和这个配方有没有问题?

我们实验室的配方如下:
5X电泳缓冲液:15.1g Tris+94.0g Gly+5.0g SDS 配成1L
转移缓冲液:3.03g Tris+14.42g Gly+200mL CH3OH 配成1L
效果不错,你可以试一下
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第1个回答  2012-08-04
转移缓冲液中不能含有sds的,sds会严重影响转印效果。
第2个回答  2010-10-04
我就是用这个配方的 没有任何问题的 这个是分子生物标准的配方
第3个回答  2010-10-08
running buffer: MOPS 106.4g,Tris base 60.6g,SDS 10g,EDTA 3g/1000ml 10x 的buffer
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