诊断骨质软化症通常依据病史、临床表现以及血液生化和X线骨骼检查。血液生化检查中，血钙可能正常或偏低，血磷降低，钙磷乘积小于正常值，血碱性磷酸酶升高。X线检查显示生长板的异常和骨质软化，与佝偻病有相似但非特异性的改变。在早期，长骨的临时钙化带可能模糊，随着病情发展，临时钙化带消失，骨密度减低，骨小梁紊乱。而骨软化病早期可能无明显变化，但会表现为骨质疏松和骨密度下降，严重时可见脊柱和骨盆的异常，如双凹型畸形和假性骨折。
血液生化检查是诊断的重要依据，如血清25-(OH)D3和1,25-(0H)2D3水平降低，提示维生素D缺乏。血清骨碱性磷酸酶升高，与骨软化症的严重程度相关，有助于早期诊断。在恢复期，这些指标会恢复正常。
X线骨骼检查是诊断骨质软化症的关键，早期的临时钙化带变化、骨密度降低以及骨小梁异常，都是重要的观察指标。对于骨软化病，X线可能显示带状骨质脱钙，尤其是在耻骨、股骨颈等部位，这与佝偻病的影像特征有所不同。
骨矿物质含量的测量是评估骨代谢异常的重要手段，通过单光子吸收法可以检测不同病期的骨矿含量变化，有助于诊断骨质软化症和佝偻病。
骨质软化症(ricketsandosteomalacia)是以新近形成的骨基质矿化障碍为特点的一种骨骼疾病。其结果导致非矿化的骨样组织(类骨质)堆积，骨质软化，而产生骨痛、骨畸形、骨折等一系列临床症状和体征。骨质软化症的流行特点与生活环境、营养程度和生活习惯等有重要关系。以前此类疾病多发生于哺乳条件差的婴幼儿、多产妇及长期哺乳的妇女，但现在此种情况罕见。长期缺乏户外活动、日照不足及周围环境污染严重的工业城市居民中的本病反而多见。该病的患病率为36.2%，女性高于男性，高发人群年龄为30～39岁(55.85%)。