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用来做PCR的标本有什么要求
如题所述
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推荐答案 2017-02-20
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pcr的
特异性检测和敏感性检测要怎么做?
答：
1.1
样本准备：以4次方国家一级或者二级标准品为基础样本
，用阴性血清进行倍比稀释，稀释后的样本浓度分别为1000IU/ml、500IU/ml、250IU/ml、125IU/ml、100IU/ml、50IU/ml、25IU/ml，每份样本使用1000μl进行检测。1.2 用质检合格核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行检测，每个浓度每批次...
基因扩增技术的
PCR标本
的制备
答：
用于PCR的标本必须经适当处理后才能使用
，因为标本中的许多杂质能抑制Taq DNA聚合酶的活性。另外，处理标本可使待扩增DNA暴露，能与引物复性。关于PCR标本制备各种专业书中介绍了许多，我们实验发现操作复杂、不慎便容易造成污染，且不实用。现介绍一种简单快速的处理方法即3%异硫氰酸胍和待检标本混合100℃，...
PCR
实验操作注意事项
有哪些
答：
1、必须在无菌无尘环境下进行操作
；2、检测人员必须通过国家临检中心业务培训并取得合格证书；3、
必须拥有标准的的PCR荧光实验室
；4、后PCR区PCR完成以后，应该留出一个专门用于反应后处理样品的地方。
PCR
为
什么
对
标本
的纯度
要求
低
答：
变性对PCR扩增来说相当重要
，如变性温度低，变性时间短，极有可能出现假阴性;退火温度过低，可致非特异性扩增而降低特异性扩增效率退火温度过高影响引物与模板的结合而降低PCR扩增效率。有时还有必要用标准的温度计，检测一下扩增仪或水溶锅内的变性、退火和延伸温度，这也是PCR失败的原因之一。
要
做PCR的
血液
标本
如何保存
答：
1、实验所用玻璃器皿应该洁净。如果制备的单个核细胞悬液
用于
细胞培养时，上述操作过程都要在无菌条件下进行，所用器材、试剂都应为无菌。2、实验中的细胞得率与室温及分层液比重等有关。分层液应避光4℃保存。3、往淋巴细胞分层液中加入稀释全血时，不得将血液冲入分离液中，须保持两层液体的清晰界面...
规范化的
pcr
实验室应注意
哪些
答：
⑹新配制的试剂在
用于
准备新
的标本
之前应该加以检验。⑺样品准备和前
PCR
区所使用的移液管在不使用时都应该小心保存。5、在前PCR区建立PCR混合物。⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分装并保存在-20℃或4℃，在实验室只涉及到扩增一种或少数几种特异序列时这样做很有用。⑵如果你的实验室...
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