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如何在dna样品中,除去残留物质
如题所述
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推荐答案 2016-12-27
1,宏基因组提取;提取的样品DNA必须可以代表特定环境中微生物的种类,除需严格遵循取样规则外,取样中应尽量避免对样本的干扰,缩短保存和运输的时间,使样品尽可能代表自然状态下的微生物原貌,获得高质量环境样品中的总DNA是宏基因组文库构建的关键之一。要采用合适的方法,既要尽可能地完全抽提出环境样品中的DNA,又要保持较大的片段以获得完整的目的基因或基因簇。所以总的提取总是在最大提取量和最小剪切力之间折中。应严格操作,谨防污染,并且保持DNA片段的完整和纯度。为了更好地反映环境中的微生物种群并且提高阳性克隆的占有率,需要在克隆之前通过不同的方法对感兴趣的目的基因或基因组进行富集,常用的富集方法有稳定同位素探针、抑制性消减杂交、差异显示、噬菌体展示、亲和捕获及DNA微阵列等技术。2,测序分析:采用Solexa进行宏基因组DNA测序,首先对特定环境微生物种群全基因组DNA进行提取。在提取微生物种群的DNA后制备DNA文库,具体步骤如下:(1)将DNA随机打断成200-500bp的片段;(2)对DNA末端进行修复;(3)将“A”碱基加入到DNA片段的3’末端;(4)在DNA片段的末端加上接头;(5)纯化连接产物;(6)PCR扩增连上接头的DNA片段;(7)检测测序文库。
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第1个回答 2016-12-27
基因(遗传因子)是具有遗传效应的DNA片段(部分病毒如烟草花叶病毒、HIV的遗传物质是RNA)。基因支持着生命的基本构造和性能。储存着生命的种族、血型、孕育、生长、凋亡等过程的全部信息。环境和遗传的互相依赖,演绎着生命的繁衍、细胞分裂和蛋白质合成等重要生理过程。生物体的生、长、衰、病、老、死等一切生命现象都与基因有关。它也是决定生命健康的内在因素。因此,基因具有双重属性:物质性(存在方式)和信息性(根本属性)。
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如何去除
无水乙醇
残留
对质粒
dna
纯度的影响
答:
去除无水乙醇残留对质粒dna纯度的影响操作步骤如下:
1、漂洗液洗涤后应离心尽量去除残留液体,再加入洗脱缓冲液
。2、漂洗液中乙醇的残留会影响后续实验,为确保下游实验不受残留乙醇的影响,可置于室温静置20-30分钟,或放到超净台上风吹15分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
如何除去DNA
提取过程
中残留
的有机溶剂和多余的盐
答:
在溶解洗脱
dna
前用70到80%的乙醇多洗几次,然后乙醇风干
DNA中
混有RNA和蛋白质,请问
怎么去除
答:
先用酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提
,这时候经常在样品中会有酚残留,所以之后再用氯仿:异戊醇(24:1)抽提,将酚抽干净,以免影响后续的实验。在抽提前还要在DNA样品中
加入1/10体积的PH5.2的3M醋酸钠
,增加盐浓度,以免DNA沉淀出来的量太少,都被抽走了。还有最好在抽提之前要把DNA样品...
异丙醇沉淀
dna
离心后的产物
答:
用乙醇清洗DNA 沉淀除去残留的异丙醇
。残留的异丙醇阻碍DNA 被再次溶解。在4℃, 微量离心管中的样品离心20~ 30min 小心地除去上清,使DNA 沉淀干燥。不能让DNA干燥得太彻底,否则,沉淀将会非常难溶解。当步骤8加入缓冲液时,沉淀应仍保待湿润。用适量的TE (pH 8.0 ) 重新溶解DNA 沉淀。
在提纯质粒
DNA中,如何
去处有机溶剂的污染
答:
我擦,提纯
DNA
用蒸馏...大湿太有境界了.如果你只是少量有机溶剂,用缓冲液-20度泡
样品
过夜,-20度乙醇把DNA沉淀离心,然后加70%乙醇震荡洗涤,离心弃上清,再加96%乙醇洗,离心,最后用DD水4度24小时复溶.可以得到纯度很高的DNA.注意弃上清的时候看好DNA别倒出来了 ...
提取RNA过程中
怎样
去掉
DNA残留
答:
一般按试剂盒操作说明进行即可,如果怀疑有DNA污染,可用DNArase处理,去掉
残留DNA
。
大家正在搜
如何去除rna中的dna
dna样品如何保存
dna电泳样品上样量
存在相当数量y染色体dna物质
dna和rna在化学组成上的区别
dna是什么物质
不参与dna复制的物质是
参与dna复制的物质有哪些
y染色体dna物质是什么意思
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