第一幕
第一景 意大利南部巴斯克乡间
农民们农忙之余，在大树下休憩乘凉，农庄女主人阿蒂娜在一旁读着传说中「崔斯坦与伊索迪因为一瓶爱情药酒而相恋无法自拔」的爱情故事。仰慕阿蒂娜已久的农村青年内摩利诺一直不敢向阿蒂娜表达深深的爱意，只得在远处望着蒂娜的倩影感叹。（咏叹调：多么美丽、多么可爱的女郎啊！）
阿蒂娜读着书，不自觉笑出声来，她虽然觉得书中情节有些滑稽，但是还是想知道「到底是什么样的药酒有如此大的魔力」（咏叹调：冷酷的伊索迪）。忽然间，由贝尔柯雷率领的军团来到农庄，原来是第二天一早军团将要移防，贝尔柯雷在离开前特此来向大家道别，除此之外，贝尔柯雷还另有目的：他对阿蒂娜同样仰慕已久，希望在移防之前，能够获得阿蒂娜的首肯成婚；阿蒂娜对于贝尔柯雷虽然颇有好感，但对于对方突如其来的求婚，表示还需要一点时间考虑；而在一旁看到此景的内摩利诺则是急着跳脚，他深怕阿蒂娜就此答应贝尔柯雷，断了他的一线希望。待贝尔柯雷率军队到一旁暂歇时，内摩利诺鼓起勇气向阿蒂娜示爱，阿蒂娜则是淡淡地说：爱情对她而言，只是一场游戏罢了，因为它一下子飘向河岸、一下子飘向草原，没有定所。她要内摩利诺打消对她的念头，但内摩利诺还是不肯死心。（二重唱：请问迷人的微风）
第二景 农庄广场
远方传来了一阵响亮的小号声，引起了村民们的注意，只看见一位穿着入时的中年绅士、乘着一辆金黄色的马车、朝着广场的方向前来。
大家都好奇这是一位什么样的人士：「是一位王公贵族呢？还是一位有钱的商人？反正他一定是一位很重要的人物！」没多久，马车来到广场上，这位谜样的人物也现身了，他就是自称「无所不医、无病不愈」的天下第一名医─杜卡马拉医生。事实上他只是一位到处招谣撞骗、贩卖假药、把纯朴的乡下人唬得一愣一愣的江湖郎中。杜卡马拉医生一阵花言巧语，让村民们相信他独特的灵药可以解除所有病痛，于是纷纷掏钱购买。(咏叹调：各位乡亲们，听了！）
在众人离去后，原本待在一旁的内摩宁诺鼓起勇气上前询问「是否有专治爱情问题的灵药呢？」想当然尔，杜卡马拉是不会让内摩利诺失望的，他从箱子里拿出一瓶「爱情灵药」，号称在喝下去二十四小时之后就会发生效用（其实杜卡马拉卖给内摩利诺的只是一瓶廉价的葡萄酒， 而之所以说「在二十四小时之后会发生效用」，这是给杜卡马拉有充份的时间好在谎言被揭穿之前逃走）。内摩利诺信以为真，满心欢喜地喝下整瓶「灵药」，正巧阿蒂娜也来到广场上，阿蒂娜看见内摩利诺独自一人、神情愉快地喃喃自语，于是便嘲笑起内摩利诺的怪异言行；内摩利诺不以为意，他心想：「反正明天一早阿蒂娜就会向他投怀送抱。」（二重唱：就让那个冷酷的人尽情嘲笑吧）
就在这个时候，军官贝尔柯雷上场，他询问阿蒂娜是否考虑答应他的求婚？阿蒂娜为了故意气在一旁傻呼呼的内摩利诺，于是也爽快地答应了贝尔柯雷的求婚，并且要马上公证结婚。内摩利诺恳求阿蒂娜将婚礼延至第二天早上（以便「灵药」发生效用），却遭到嘲笑与拒绝；阿蒂娜邀请大伙儿参加她的结婚喜宴，只留下广场上「抢天呼地、喊着杜卡马拉医生名字」的内摩利诺。
(第一幕落）
第二幕
第一景 阿蒂娜的农庄里
在阿蒂娜结婚前的庆祝宴会上，她和杜卡马拉医生分别假扮成「渡船女郎」和「老市议员」，表演了一段逗趣的对口二重唱（二重唱：你有钱，我有美丽，咱俩凑一对吧）。
随后愁容满面的内摩利诺上场，他央求杜卡马拉医生再提供一些药效更快的灵药，但是内摩利诺却已身无分文。适巧军官贝尔柯雷遇见在一旁沮丧的内摩利诺，他怂恿内摩利诺加入军队，如此一来就可以得到一笔金钱；内摩利诺虽有些不愿，但是为了爱情，也只好签下军队卖身契。（二重唱）
第二景 农庄广场
广场上一群村姑们七嘴八舌地在谈论内摩利诺，原因是她们听说内摩利诺有一位富有的伯父过世了，身后留下一大笔遗产给内摩利诺─这也就是说：内摩利诺是一位百万富翁了！每一位女孩都想巴结内摩利诺、甚至想嫁给他，当一位少奶奶。
随后内摩利诺也上场了，他因为喝多了杜卡马拉医生卖给他的「爱情灵药」，而有点醉醺醺的，对于伯父过世的事情，内摩利诺并不知情，他只把围绕在他身边的女孩们当成是药效发挥的结果；随后登场的阿蒂娜和杜卡马拉医生看到姑娘们对于内摩利诺的热情表现，也大感吃惊！稍后杜卡马拉医生也向阿蒂娜解释了事情原委，阿蒂娜才知内摩利诺为了她做了这么大的牺牲，甚至还卖身给军队，不禁大受感动而流下了眼泪。内摩利诺在一旁见到此景，感叹自己虽然失去了做平常百姓的自由（因为第二天就要随军队离去），但是阿蒂娜为他流下的眼泪，让他死也无憾！（咏叹调：一滴美妙的爱情眼泪）
阿蒂娜回来时，手上拿着一份文件，那正是内摩利诺的卖身契；她从贝尔柯雷那里赎回这份合约，并且交还给内摩利诺，从此还他自由之身，同时阿蒂娜也向这位先前她还有点不屑的傻大个儿，表达了自己深深的爱意。贝尔柯雷上场时看见阿蒂娜与内摩利诺的亲蜜拥抱，虽有不满，但随后又表示「天涯何处无芳草」。内摩利诺眼见自己的爱情终于有了圆满的结局，也大大感谢一旁的杜卡马拉医生，而这位「江湖郎中」还免不了吹虚一番他的灵药多么有效，又引起了村民们的抢购。最后则在村民们的欢送之下，杜卡马拉医生载着满满的荷包，欢欢喜喜地离去，只有贝尔柯雷暗自诅咒杜卡马拉医生的马车会翻车！
