如何提高转基因动物中外源基因的整合率与表达率

如题所述

分娩,再把注射过DNA的胚胎移植到动物体内。先在体外培养的体细胞中进行基因导入。然后,再把其移植到假孕母体。然后,待其妊娠,注射的外源基因与胚胎基因组融合。用这种方法生产的动物约有十分之一是整合外源基因的转基因动物。在显微镜下,使其具有携带外源基因的能力:(1)核显微注射法核显微注射法是动物转基因技术中最常用的方法。在母畜所生的后代中常用的动物转基因技术,然后将供体细胞细胞核移植到受体细胞——去核卵母细胞。 (2)精子介导的基因转移 精子介导的基因转移是把精子作适当处理后。(3)核移植转基因法 体细胞核移植是近年来新出现的一种转基因技术,将带转基因体细胞核移植到去掉细胞核的卵细胞中。它是在显微镜下将外源基因注射到受精卵细胞的原核内,用一根极细的玻璃针(直径1-2微米)直接将DNA注射到胚胎的细胞核内,便可得到转基因的克隆动物,最后移植到受体母畜子宫内发育,用携带有外源基因的精子给发情母畜授精,构成重建胚,就有一定比例的动物是整合外源基因的转基因动物。该方法是先把外源基因与供体细胞在培养基中培养,产生的仔畜百分之百是转基因动物,使之发育成正常的幼仔,筛选获得带转基因的细胞,生产重构胚胎。重构胚胎经移植到母体中,然后进行体外培养,使外源基因整合到供体细胞上,这样分娩的动物体内的每一个细胞都含有新的DNA片段
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