步骤一:基因文库内寻找目的基因;步骤二:进行PCR基因扩增;步骤三:选取合适的质粒作为目的基因载体;步骤四:利用切位点相同的
限制性内切酶分别对利用PCR扩增技术扩增过的DNA和质粒进行酶切;步骤五:利用与限制性内切酶切点相对应的
DNA连接酶进行目的基因与质粒的组装;步骤六:重复以上步骤,在质粒中导入抗性基因以及
启动子、终止子;步骤七:利用显微注射技术导入目的基因;步骤八:利用抗性基因所抗抗生素,选出目的基因成功导入的细胞;步骤九:单另培养细胞,检查是否可以产生目的基因对应蛋白,如果可以产生,即为目的基因表达成功,在检测其安全性後,可以批量培养