如何从水稻病杆分离稻瘟病菌种 稻瘟病菌种

Question

如题所述

Answer 1

1,选择典型的单个病斑，用剪刀或者解剖刀从病斑边缘切取小块（3-4mm）病斑数块。
2，将病组织放入70%酒精中浸3-5s，再在0.1%汞液中消毒30-60s。
3，用无菌操作法将病组织移至平板培养基上，每皿放4-6块。放之前吸去多余水，防止感染。
4，培养皿倒置防止于23-25摄氏度恒温箱暗培养。一般3-4d观察菌丝生长情况。
5，若病组织小块上均长出较为一致的菌落，则多半为要分离的病原菌。在无菌条件下，用接种针自菌落边缘取小块移入斜面培养基，在23-25摄氏度恒温箱内暗培养，数10天后，观察菌落生长情况，如无杂菌即得到所需纯菌株，变可放于0-4摄氏度保存。

第二种是单孢培养

取发病较好的组织，在灭菌蒸馏水中浸泡6-12小时，再将病组织放入70%酒精中浸3-5s，再在0.1%汞液中消毒30-60s。取出吸干后，将病组织置于湿度100%，恒温23-25摄氏度的恒温箱中暗培养12-24h，取出去除两端，并在滤纸上把水吸干，然后轻轻将其孢子震落清水培养基上，然后再显微镜下挑取单孢培养。