第1个回答 2017-02-27
四、基因疫苗的免疫方法 1、直接注射法：裸质粒DNA或经脂质体包裹的裸质粒DNA直接从肌肉、皮内、皮下、粘膜、静脉内注射。包裹DNA的脂质体能与组织细胞发生膜融合，而将DNA摄入，减少了核酸酶对DNA的破坏。 2、基因枪轰击法：将质粒DNA包被在金微粒子表面，用基因枪将包被DNA的金微粒子高速穿入组织细胞。这种方法效率高，免疫应答强烈，但操作复杂，需特殊设备。 3、细菌或病毒携带法：选择一种容易进入某组织器官的细菌或病毒，将其繁殖基因去掉形成繁殖缺陷菌株，然后将质粒DNA转化到该细菌或病毒中，当这些细菌或病毒进入某组织器官后，由于不能繁殖，则自身裂解而释放出质粒DNA。 4、口服、喷鼻或滴鼻法。五、基因疫苗的免疫应答反应的影响因素 1．目的基因的选择 目的基因即疫苗DNA的构建和选定，这是决定核酸免疫效果的关键。最好选择病毒的主要保护性抗原基因。 2．载体质粒及启动子的选择 载体质粒的种类及其结构组成对核酸免疫的水平有明显影响。研究发现PUC19表达效果优于PBR322。而且，表达载体能否在哺乳动物细胞中高水平表达，启动子也很关键。 3．接种方法及途径 Fynan等（1993）用不同方式对核酸免疫的效果进行比较，结果发现用基因枪接种比直接注射核酸疫苗效果好600－6000倍。而且研究表明，肌肉注射免疫效果比鼻腔内。腹腔内、静脉内和皮肉内免疫效果都好。 4．接种部位的预处理 实验表明，用25％高渗蔗糖或甘油在核酸疫苗接种前须处理接种部位如肌肉，可使疫苗DNA的表达水平提高。而且，预先给接种的肌肉部位注射蛇毒或局部麻醉剂，然后再做核酸疫苗的注射，也可提高表达水平。 5接种剂量和次数 许多研究表明，免疫应答强度和免疫保护与接种剂量和次数有一定的相关性。而且，提高接种剂量可否提高体液和细胞免疫水平，是随着抗原基因的种类不同而变化的。对于无毒性的表达蛋白，应采用较高剂量和较多接种次数，这将产生较高水平的表达蛋白和抗体。 6.增强剂和佐剂的应用 细胞因子基因如TNF、GM－CSF、IFN以及IL－2、IL－4和IL－12等，在与核酸疫苗共同接种时，常能明显提高体液和细胞免疫反应。但是，细胞因子基因在与疫苗DNA共接种时，并不必然产生免疫促进作用，不同的细胞因子经常产生不同的效果，甚至有负面效应产生。 7．实验动物年龄和品系的影响 许多研究表明，幼龄动物接种DNA时，在体内表达水平较高，并产生较好的免疫应答。而且，核酸疫苗不受母源抗体的抑制，在新生动物和婴儿的感染防治上具有广阔的应用前景。动物基因型不同，免疫应答的强度也有所不同。本回答被网友采纳