做药敏试验需要什么

Question

如题所述

Answer 1

1. 药敏试验的执行标准
美国临床标准委员会（NCCLS）推荐的K-B琼脂法是药敏试验的标准方法。试验选用的抗生素纸片由中国生物制品鉴定所提供，包括氨苄西林（AMP）、阿莫西林/克拉维酸（AMC）、头孢噻吩（CFT）、头孢噻肟（CTX）、庆大霉素（GEN）、萘啶酸（NAL）、环丙沙星（CIP）、四环素（TBT）、利福平（RFA）和复方新诺明（SMZ）。
2. 药敏结果的判定
药敏结果的判定依照NCCLS手册2005版的规定进行。判定标准包括观察抑菌圈的直径，使用游标卡尺从平板背面测量最接近的整数毫米并记录。抑菌环边缘以肉眼不可见细菌生长为界限。
3. 操作方法
操作方法包括培养菌株、比浊、涂布菌液、贴纸片、孵育和测量抑菌圈直径等步骤。每一步骤都有详细的要求，如涂布菌液后需等待琼脂吸收水分后再贴纸片，确保纸片贴合平整。
4. 质控菌株的使用
每次药敏试验必须使用ATCC 25922大肠杆菌作为质控菌株。质控菌株的抑菌圈直径需在允许范围内，测试菌株的结果才可报告。
5. 0.5麦氏比浊管的配制
0.5麦氏比浊管的配制方法包括混合BaCL2和H2SO4溶液，置于室温暗处保存，使用前需混匀。配制好的比浊管有效期为6个月。
6. 注意事项
注意事项涵盖培养基的制备、药敏纸片的储存、不稳定药物的保存、质控菌株的维持等方面。例如，制备MH琼脂平板时需确保pH值正确，药敏纸片应冷冻保存，质控菌株应定期传代以保持其稳定性。
7. 质量控制
质量控制方法包括使用与常规实验相同的操作方法测定质控菌株的抑菌环直径。需使用新鲜传代的菌种，并确保涂布方法、抗菌素种类与常规操作一致。