1,醋酸纤维薄膜的准备,将醋酸纤维薄膜切成10cm*2.5cm的膜条,用镊子夹住缓慢放入巴比妥缓冲液中30分钟,充分浸透,取出用滤纸吸去多余的缓冲液。
2,点样,用微量吸管将5ug,但白字样品点在薄膜中英。
3,电泳仪湿润的薄膜条置于电泳仪的长条架子上,薄膜条两端与滤纸相接触,拉直膜条,将滤纸条的另一端浸入缓冲液中,缓冲液两槽的液面要水平,以避免虹吸现象。加盖密封,注意防止缓冲液蒸发并避免水滴落在膜条上。静止10分钟。接通电源开始电泳,调节好电压使之稳定,以
20mv/cm的电场强度电泳1小时左右。
4,显色,电泳完毕后,取出膜条,用溴酚蓝显色法或者氨黑10B显色法处理,取出膜条后浸入氨基黑染液中染色5~10分钟,然后用漂洗液洗5分钟,直到区带清晰为止。 若要保存图谱或使用分光光度计直接测定,则可在膜条染色后,洗褪底色,完全干燥后,置于透明液中5分钟,取出,干后即可。
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