61 ripa是全细胞裂解液还是细胞组分裂解液

Question

如题所述

Answer 1

WCL的全称是whole cell lysate，中文就是全细胞裂解液对吧?如果是这样的话，这个部分的目的就是研究细胞里面你想要研究的蛋白表达情况。IP的就是你用抗体pull down以后得到的目的蛋白。 我们做co-IP研究A和B蛋白相互作用的时候，一般会在细胞里面转染质粒，分别表达A和B蛋白。等蛋白表达出来以后，裂解细胞，得到WCL，直接做western blotting，首先确定它们都能表达且表达量一致。剩下的会加A蛋白的抗体，将它IP下来，如果它与B蛋白有相互作用也会将B蛋白拉下来。这时再用B蛋白的抗体看看能否检测到B蛋白，就能研究AB有没有相互作用。你是做什么实验啊，可以简单说一下吗?这样才能帮你分析哈。如果你要诱导细胞的话，应该就是没有有诱导的细胞裂解液，我们一般加30ug左右全蛋白就可以跑出来条带了。