尿素是一种重要的农业肥料，需经细菌的分解才能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，

Question

尿素是一种重要的农业肥料，需经细菌的分解才能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请分析回答：（1）上图是利用______法进行微生物接种，把聚集的菌种分散逐步到培养基的表面．除此方法外，常用的微生物接种方法还有______（写一种）．（2）如果要对培养的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行______，灼烧的接种环冷却后才能接种的原因是______．（3）下面是两种培养基的配方：表1：A培养基配方KH2PO4Na2HPO4MgSO4?7H2O葡萄糖尿素琼脂H2O1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g1 000mL表2：B培养基配方纤维素粉NaNO3Na2HPO4?7H2OKH2PO4MgSO4?7H2OKCl酵母浸膏H2O5g1g1.2g0.9g0.5g0.5g0.5g1 000mL①配制培养基的操作步骤______（用字母顺序回答）．a．倒平板 b．计算 c．溶化 d．称量 e．灭菌②通常培养基采用______法灭菌，在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是______．③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述______（A、B）配方的培养基，在该培养基中加入______指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素．④据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是______．（4）尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它们能合成______．

Answer 1

（1）分析题图中培养基的配方可知，此培养基中缺乏植物组织培养所必需的植物激素，所以此培养基不能用于植物组织培养．
（2）分析题图培养基配方可知，此培养基是以尿素为唯一氮源的培养基，这样只有能分解尿素的微生物才能生长，不能分解尿素的微生物因缺乏氮源而无法生长，起到了筛选能分解尿素的菌的作用．
（3）分析培养基可知，目的菌生长所需的氮源来自尿素，目的菌生长所需的碳源来自葡萄糖；由于目的菌是需氧菌，培养时需要震荡培养以便为微生物生长提供足够的氧气．
（4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，下列材料或用具中：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶和吸管；③实验操作者的双手．其中需要消毒的是③．
（5）在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，ph增高，使指示剂变红色．细菌因没有生物膜系统，其分泌酶与真核细胞蛋白质的分泌方式不同．
故答案为：
（1）不能
缺少植物激素（或缺少植物需要的各种营养）
（2）筛选目的菌 选择
（3）为目的菌提供氧气
（4）③
（5）酚红指示剂 生物膜

Answer 2

（1）图示利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释到培养基的表面．除此方法外，常用的微生物接种方法还有稀释涂布平板法．
（2）接种环通过灼烧灭菌，灼烧的接种环冷却后才能接种的原因是防止高温杀死需接种的微生物．
（3）①配制培养基的操作步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板．
②通常培养基采用高压蒸汽灭菌法灭菌，在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒臵，目的是防止培养皿内壁上出现的冷凝水污染培养基．
③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述以尿素为氮源的培养基，在该培养基中加入酚红指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素．
④B培养基的成分中，碳源为有机物，所培养微生物的同化作用类型是异养型．
（4）尿素分解菌能分解尿素的直接原因是能合成脲酶．
故答案为：（1）平板划线 稀释涂布平板法
（2）灭菌 防止高温杀死需接种的微生物
（3）①bdcea
②高压蒸汽灭菌 防止培养皿内壁上出现的冷凝水污染培养基
③A 酚红 
④异养型
（4）脲酶本回答被提问者采纳