（1）形成重组质粒时需要限制酶和DNA连接酶．由于导入目的基因时将氨苄青霉素抗性基因破坏，没有破坏四环素抗性基因，因此培养基中需添加四环素，以便于筛选出导入了目的基因的顶芽细胞，这种培养基为选择性培养基．（2）利用植物组织培养技术将导入目的基因的红豆衫顶芽离体细胞培养发育为幼苗，其原理为植物细胞的全能性．形成愈伤组织后，由于遗传信息的执行情况不同，经再分化可形成各种组织细胞．（3）配制的MS培养基在接种前需采用高压蒸汽灭菌进行灭菌处理，避免杂菌在上面迅速生长消耗营养，且有些杂菌会危害培养物的生长．生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，该培养基中还需添加这两种植物激素，添加激素时还需控制好两种激素的浓度和使用顺序及用量比例．（4）将红豆杉顶芽切段分离成单个的顶芽离体细胞时，常用方法是酶解法，所需酶为果胶酶．故答案为：（1）限制酶和DNA连接酶 四环素 筛选导入了目的基因的顶芽细胞 选择（2）全能 遗传信息的执行情况不同（3）高压蒸汽灭菌 生长素和细胞分裂素 浓度和使用顺序及用量比例（4）果胶酶
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