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质粒提取最后为什么用纯水,而不采用洗脱液来溶解dna
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推荐答案 2023-03-26
质粒提取最后采用洗脱液来溶解dna。根据查询相关公开信息显示,洗脱液是一种pH值略高的缓冲液,含有一定浓度的盐类和其他添加剂,这些物质可以帮助稳定DNA的结构,防止其降解和氧化,并且使其易于溶解在水中,洗脱液中的盐类和其他物质还可帮助去除DNA上可能存在的蛋白质等杂质,提高DNA纯度。
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核酸的保存,小
为什么
RNA可以放在
纯水
里
DNA
却不能?
答:
你问反了吧,做
质粒DNA
纯化,用试剂盒最后一步
洗脱
就可以用热的
纯水,
然后冷冻就OK了 而对于大多数RNA,由于是单链,而且环境中有菌,存在大量的 RNA酶 ,一般不容易保存,有些RNA酶热灭菌都不能失活
细菌提
质粒最后
一步
为什么
要加入无rna酶得水.
答:
只要是纯水就可以了,在无金属离子辅助下,DNA酶一般不起作用
。要没RNA酶,可能是为了之后的实验考虑吧。。。
用TE稀释
质粒
与用超
纯水
稀释有
什么
不一样的
答:
我做补充如下:1)T(tris)是弱碱性,不容易导致核酸水解(
DNA
在酸性下更易自行水解);2)E(EDTA)可螯合DNA 水解酶的辅酶镁离子,抑制DNase活性,阻止DNA被酶解。但由于TE(主要是E)对一些 精密实验 比如酶切 甚至PCR 有负面影响(也作为酶的抑制剂),多使用很稀的TE 如0.1X 的TE作为buffe...
质粒提取
过程中有哪些注意的问题。
答:
以常见的试剂盒
提取
为例:1.菌的活性:如果菌种过久或保存不当
,质粒
拷贝数可能会很低,影响最终的浓度;2.基因组
DNA
污染:在碱裂解时,如果溶液配制或体积不对,或剧烈震荡,会带入基因组
dna
;3,蛋白污染:碱裂解后,需高速离心,如果时间或转速不够,蛋白没有完全沉降,或吸取上清时混入沉淀,会带来...
用TE稀释
质粒
与用超
纯水
稀释有
什么
不一样的??
答:
和ddH2O相比,TE溶液有利于保证核酸物质的稳定性,便于长时间的保存。个人经验:TE配置不合格的话会影响下游的一些操作,一般都是直接用ddH2O。
RNA分离及
提取
的方法
答:
通过离心,可除去大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA及蛋白质
,质粒DNA
尚在上清中,然后用酚、氯仿
抽提
进一步纯化质粒DNA。实验步骤:1. 取含有pUC18质粒的大肠杆菌菌液于LA培养基上37℃过夜培养;2. 用无菌牙签挑取单菌落,接种于含有Amp抗生素的LB培养基中,37℃摇床~250 r/min过夜培养;3. 吸取1.5 ...
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