同工酶电泳实验原理:
•同工酶是一类由具有不同分子结构和大小但具有相同催化功能的酶。同工酶分子的多种形式是由基因决定的,也即同工酶是基因表达的直接产物。由同一基因座的不同
等位基因编码的各种同工酶又称为等位酶,它们从分子水平上反映了等位基因的相对差异。因此,同工酶不仅是一种生理生化指标,而且也是一种可靠的遗传标记。
•制备丙烯酰胺凝胶时其凝胶的孔径由凝胶浓度(100毫升凝胶溶液中含有单体和
交联剂总克数)决定。当采用垂直平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳体系时,一般上层是大孔径的浓缩胶(pH 6.8),下层为小孔径的分离胶(pH 8.9),电泳
缓冲液为Tris-
甘氨酸缓冲液(pH 8.3)。在这种不连续系统里,存在着电荷效应,分子筛效应和浓缩效应。蛋白质(酶)按其电荷效应和分子筛效应而被分离在凝胶的不同位置上。用此凝胶板与酶反应底物进行催化反应,再用生物染料染色便形成肉眼可见各种酶带。