质粒DNA提取和细胞基因组DNA提取的异同

Question

如题所述

Answer 1

不同点

一、提取方法不同

DNA提取主要是CTAB方法，其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法。生物方式：酶法。

质粒抽提方法即去除 RNA，将质粒与细菌基因组 DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。

二、提取原理不同

质粒DNA提取用到三种溶液以及硅酸纤维膜（超滤柱）。 溶液Ⅰ：50 mM葡萄糖 / 25 mMTris-HCl/ 10 mMEDTA，pH 8.0；溶液Ⅱ：0.2 N NaOH / 1%SDS； 溶液Ⅲ：3 M 醋酸钾/ 2 M 醋酸/75%酒精。

细胞基因组DNA提取

保证核酸一级结构的完整性；核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度；其他核酸分子，如RNA，也应尽量去除。

三、提取复杂程度不同

质粒DNA提取一般用沸水浴法和碱裂解法，它主要是将细胞内的环状质粒提取出来，一般需要用SDS裂解，RNA酶降解，然后过柱，再进行洗脱.过程比较简单。

而基因组DNA提取则较为复杂，也需要用SDS裂解和RND酶降解，但降解时间较长，同时对有些革兰氏阳性细菌还要进行溶菌酶处理，最后用氯仿-苯酚进行除蛋白，这一步重复进行多次，在用氯仿除去多余的苯酚，用乙醇清洗烘干后溶于TE缓冲液中。整个过程比提质粒更复杂，耗时也更长。

相同点

都是去除 RNA、除蛋白质及其它杂质。

参考资料来源：百度百科-质粒提取

参考资料来源：百度百科-dna提取

Answer 2

质粒小，复性容易， 而染色体DNA大 ，不易复性；这导致两种DNA提取采用完全不同的策略。质粒dna提取，为了区分于DNA，都采用首先从混合物中分离出来，然后逐步纯化；而染色体DNA提取的策略则为逐步去除其他杂质，最后剩下的就是DNA了。质粒DNA提取方法有几种，最常见的碱裂解法利用碱变形（加溶液II）后用醋酸溶液快速复性（溶液III），这样使得质粒DNA可以复性而溶解，而GenomeDNA不能复性而沉淀，从而将他们分开。而后面的纯化如除蛋白（酚 、氯仿），除盐（75%酒精），沉淀（酒精、异丙醇等）两者类似。当然两者都有很粗略的简易提法，那就完全大相径庭啦。本回答被提问者采纳

Answer 3

回答都很好了，我这里就补充下提取质粒DNA的试剂盒吧，一般试剂盒公司都有卖的，如BIOG就不错的，也有专门用于去内毒素的质粒提取试剂盒。