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His镍柱标签蛋白纯化用什么填料比较好???
如题所述
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推荐答案 2012-07-06
当然是用PALL的IMAC HyperCel金属亲和层析填料了。
动态载量高,而且是一次离子螯合操作,多次稳定的纯化 。
价格也便宜,目前还在搞买一送一的活动。
温馨提示:答案为网友推荐,仅供参考
当前网址:
http://66.wendadaohang.com/zd/DDDx9sisv.html
其他回答
第1个回答 2012-06-30
上海生工有NI-NTA树脂卖,产品货号 BSP033-2,可以用于His镍柱标签蛋白纯化
第2个回答 2012-07-02
七海复泰生物的镍柱很好用
第3个回答 2012-12-13
我们都是用 PAN001-100 这个货号的 具体是哪个牌子的忘了 很好用
相似回答
...我的用的无血清培养基,带
His标签
,问下怎么
纯化
,感谢
答:
通常如果不知道一个蛋白的结合能力,
最好的就是使用锌离子和中性的磷酸或者乙酸盐
,同时含有0.15-0.5M NaCl 去垢剂不会影响蛋白质的结合能力 金属离子的取代意味着蛋白发生了结合。这种现象可以通过颜色来决定 洗脱蛋白:(3种方法)1 降低PH(一步或者分步),大部分蛋白溶解于PH4-6最终3-4是可容的...
蛋白纯化镍柱
和
填料
的购买
答:
就做一种并且要求不是很高的话买个国产的预装柱就行了
,方便好用还便宜,大小根据你的需要选择。我买的七海复泰的,载量是20mg/ml,价格大概在70块钱/ml吧
蛋白
过
镍柱纯化
的原理和步骤是
什么
答:
Ni柱中的氯化镍可以与有
HIs
(组
蛋白
)
标签
的蛋白结合,也可以与咪唑结合。步骤是:过柱子前可以选择Ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡4个柱长,然后蛋白上样,你可以让他自己挂,这样挂柱子的效果好一些,如果流速太慢,可以加个恒...
我也是做
蛋白纯化
的,有种蛋白第一次纯化时,也是非常杂,你之前又遇到过...
答:
一般可溶性表达都会遇同类问题,个人觉得有如下方面可以考虑:仔细研究
填料
的说明书,同样是
His
-tag或GST
标签
的填料,但不同厂家,或者不同分辨率,其缓冲液和洗脱浓度都是有差异的,务必注意!比如,在选择填料时,可选择颗粒稍微细些的填料,分辨率会更好些。在样品的各阶段都要控制杂
蛋白
,以最常见的...
Ni-NTA 树脂
纯化his蛋白
时为何用巯基乙醇
答:
为了保证
蛋白质
的二硫键不被氧化。一般情况下
纯化蛋白用
DTT,但是
his
-tag要避免用DTT,因为DTT会造成Ni/Co离子还原。所以用巯基乙醇。一般来说巯基乙醇量的7倍和DTT效果相当。
镍柱纯化蛋白
为
什么
加pmsf和dtt
答:
为了防止细菌本身的
蛋白
酶降解待纯化的目的蛋白,通常在破碎菌体,上柱的过程中会加PMSF。使用时请注意防护,有毒。DTT为二硫苏糖醇,一般加在平衡上柱缓冲液和洗脱缓冲液中,纯化的目的蛋白天然结构如果有二硫键,那么在纯化这类蛋白时,推荐加入DTT,但用
镍柱纯化
时,浓度要低,1mM就够了。
大家正在搜
镍柱纯化his蛋白步骤
镍柱纯化蛋白的步骤
镍柱纯化蛋白的原理
镍柱纯化蛋白结合时间
镍柱纯化蛋白说明书
镍柱纯化蛋白浓度低
镍柱纯化蛋白20mM就洗脱出峰
镍柱纯化蛋白质
蛋白纯化Tris
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