质谱流式细胞技术（CyTOF）常见FAQ

Question

如题所述

Answer 1

探索CyTOF的卓越之旅：常见问题解答

对于CyTOF技术，您是否对它的速度、样本需求、技术成熟度、项目流程等存有疑问？让我们逐一解开这些关键问题，深入理解这项革命性的单细胞分析技术。

CyTOF速度与样本准备

CyTOF的检测速度如同疾风，每秒可分析500个细胞。对于30万细胞的常规检测，大约只需10分钟，但具体时间会根据样本量有所不同。确保您的样本细胞量在4×10⁶左右，活率保持在70%以上，以确保最佳的检测效果。

样本适应性与类型

CyTOF主要适用于人源和小鼠源样本，涵盖外周血、骨髓、组织等多类型样本。它要求细胞质量高，尤其是对于外周和组织样本，建议在寄送前制成单细胞悬液，并经过梯度冻存和干冰运输，以减小长途运输中的损伤。

技术成熟度与比较

CyTOF技术已获得2100多篇学术论文的认可，其中30%发表在顶级期刊如《Nature》和《Science》。相较于单细胞测序，CyTOF在蛋白层面的检测通量远超（100万细胞对比1万细胞），且提供更全面的蛋白质信息。

样本准备与项目周期

除了基本的细胞数量和活率要求，样本制备时需避免金属离子干扰。CyTOF项目周期因样本量、抗体准备和定制需求而异，一般20例以下样本的分析周期在6-8周。

抗体选择与定制

华盈生物提供定制化的30/33marker Panel，以及10个定制通道。定制抗体需确保与CyTOF兼容，并考虑到实验风险，尤其是抗体偶联过程的周期较长。

数据分析与解读

CyTOF结果以FCS格式呈现，包含每个细胞的蛋白表达信息。主流平台如Cytobank和Flowjo可进行分析，R语言也有丰富的分析包。我们提供基础分析支持，帮助您从海量数据中揭示关键细胞差异。

胞内蛋白检测与超多抗体同步

CyTOF不仅限于膜蛋白，胞内蛋白和核蛋白检测皆可。其独特的金属标签系统可实现30-50种蛋白的同步检测，提供全面的细胞状态研究。

应用范围与价值

CyTOF的应用领域广泛，包括血液、心血管、神经等多个领域。即使在单细胞测序后，CyTOF也能补充蛋白层面的信息，帮助发现罕见但关键的细胞亚型。

后续研究与可能性

CyTOF发现差异细胞后，后续研究可针对其功能、细胞因子、细胞状态变化以及空间关系进行深入探究，揭示细胞在疾病进程中的关键作用。