如何对外植体进行表面消毒?

Question

如题所述

Answer 1

植物组织培养过程中，对外植体进行表面消毒是关键步骤。通常，使用70%体积分数的酒精和2%至10%质量分数的次氯酸钠溶液进行消毒。下面是外植体消毒的具体步骤：
1. 清水冲洗：首先，将外植体置于清水下冲洗，可加入少量洗衣粉，用软刷轻轻刷洗。之后在流水下持续冲洗20分钟。
2. 酒精浸泡：用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，然后将其放入70%至75%体积分数的酒精中摇动2至3次，总时间不超过30秒。
3. 无菌水冲洗：将外植体从酒精中取出，在无菌水中震荡冲洗3次。
4. 次氯酸钠溶液浸泡：用无菌吸水纸再次吸干外植体表面的水分，然后将其放入2%至10%的次氯酸钠溶液中浸泡约20分钟。
5. 无菌水清洗：取出外植体，在无菌水中震荡冲洗5次。
注意事项：在上述流程中，酒精主要起到表面消毒的作用，而次氯酸钠溶液的消毒能力更强。消毒剂的使用时间应根据外植体的种类来决定。通常，幼嫩的组织如芽尖的消毒时间应较短，而茎和根的消毒时间可以稍长。原则是既要彻底杀灭外植体表面的微生物，又要避免损害或杀死外植体本身。
除了上述消毒剂，过氧化氢溶液（10%，处理5至15分钟）和氯化汞溶液（0.1%至0.5%，处理2至7分钟）也是有效的消毒剂。然而，需要注意的是氯化汞溶液有毒，使用时必须小心操作。