在组培实验中怎样选择和处理外植体

Question

如题所述

Answer 1

1. 在植物组织培养实验中，外植体可分为两大类：带芽外植体和分化组织外植体。带芽外植体包括茎尖、侧芽、原球茎和鳞芽等，它们通常含有较高的生长潜力和易于诱导丛生芽。通过添加适量的生长素和细胞分裂素，可以有效促进其芽苗的发生。
2. 分化组织外植体则由成熟的茎段、叶片、根、花茎、花瓣、花萼、胚珠、果实和花粉等组成。这些组织通常用于诱导愈伤组织的形成，而愈伤组织是进一步培养和繁殖的基础。
3. 在选择外植体时，通常优先考虑带芽的外植体，因为它们更易于培养成功，并且可以较快地产生新的植株。
4. 外植体的大小也是需要考虑的因素。例如，茎尖的大小通常在0.1至0.5毫米之间，而叶片和花瓣的大小则在0.5至1平方厘米左右，茎段的大小则在0.5至1厘米之间。适当大小的外植体有利于培养过程的成功。
5. 消毒灭菌是外植体处理中至关重要的一步。首先，外植体需要用流水冲洗约1小时，以去除表面的污物。接着，使用75%的酒精进行浸泡，时间为30秒，之后用无菌水冲洗3次。然后，将外植体浸泡在0.1%的升汞溶液中约10分钟，再次用无菌水冲洗3至5次，以确保外植体的表面消毒彻底。
6. 完成消毒步骤后，外植体即可接种到配制好的培养基中，开始培养过程。这一步骤是实现外植体脱分化和再分化的关键，也是整个组织培养实验成功的关键环节。