PCR实验室的布局应该怎样

Question

如题所述

Answer 1

PCR实验室的布局应该遵循以下原则：

SICOLAB喜格-实验室工程建设服务商

1. 区域划分：标准的PCR实验室应分为试剂配制区、样品处理区、核酸扩增区和产物分析区。每个区域在空间上应完全独立，不能相通。

2. 布局方向：进入各工作区域必须严格按照单一方向进行，不同的工作区域使用不同的工作服，例如不同的颜色。工作人员应按照公共清洁区、更衣间（更换洁净服）、缓冲间、污染实验区的路径进入实验室，并按照污染试验区、缓冲间、淋浴间（有条件的可设置）、更衣间、公共清洁区的路径离开实验室。

3. 通风系统：各区域应设有独立的通风系统，扩增前和扩增后区域应具有独立通风系统，扩增后区域保持负压状态，其它区域保持正压或常压状态，防止扩增产物进入扩增前的区域。进风口和出风口不能设在建筑的同一平面，要避免排出的空气被重新吸进实验室。

4. 清洁与消毒：各区域的建筑材料应选用易清洁、耐腐蚀的，便于进行清扫和消毒。器具在使用前应经过彻底清洗并消毒，以防止交叉污染。

5. 缓冲间：各区域应设有缓冲间，工作人员和物品应从试剂准备区到扩增区单向工作流动，不得逆向流动。

Answer 2

基因扩增实验又称PCR实验，其特点是能将微量的DNA大幅增加，PCR是分子生物学研究和实验的常规方法，广泛应用于生物学各个领域，例如：艾滋病检测、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的检测和诊断，DNA指纹、个体识别、亲子鉴定及法医物证，动、植物检疫，动物及其衍生产品检测，动物饲料、化妆品、食品卫生检测，转基因作物与转基因微生物检测等。

一、PCR实验室布局

PCR实验室原则上为试剂准备区、样品制备区、扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域并设有专用走廊，各工作区域应设缓冲间，工作区与缓冲间宜安装连锁装置。不同功能的工作区应是分隔独立的，各工作区有明显的标志，不能直通，如果紧密相连，需安装物品传递窗。前两区为扩增前区，后两区为扩增后区，扩增前区与扩增后区应严格分开。实验材料、试剂、记录纸、笔、清洁材料等，只能从扩增前区流向扩增后区，即从试剂准备区→样品制备区→扩增区→扩增产物分析区，不得逆向流动。实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区，不得逆向流动。各工作区顶部应安装紫外灯，紫外灯的波长为254nm，每20㎡一支40W的紫外灯。

二、实验室各区功能及主要设备

1、试剂准备区：主要进行试剂的制备、分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区，不得经过其它区域。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的试剂。本区主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、振荡器等。

对于气流压力的控制，本区并没有严格的要求。

2、样品制备区：主要进行样品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水浴等。

本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为正压，以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。

3、扩增区：主要进行DNA扩增。此外，已制备的DNA模板 (来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有：扩增仪、冰箱、离心机、加样器等。

本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为负压，以避免气溶胶从本区漏出。

4、扩增产物分析区：扩增产物的测定。本区主要设备有酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等。

本区的压力梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。



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