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在做western blot时,跑胶的电流为什么越来越低
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推荐答案 推荐于2018-04-01
在做western blot时,跑胶的电流越来越低可能原因有
所加
缓冲液
不够新鲜,或者说是已经重复使用过很多次。内外槽缓冲液没有一定的落差,缓冲液的pH不够准确。如果是在恒压的状态下,因为凝胶里的导电介质逐渐减少,电流逐渐减少也是比较正常的情况。
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在做western blot时,跑胶的电流为什么越来越低
答:
在做western blot时,
跑胶的电流越来越低可能原因有 所加缓冲液不够新鲜
,或者说是已经重复使用过很多次。内外槽缓冲液没有一定的落差,缓冲液的pH不够准确。如果是在恒压的状态下,因为凝胶里的导电介质逐渐减少,电流逐渐减少也是比较正常的情况。
western blot时电流
过小是
什么
原因
答:
首先要看你的电泳液是不是用了很多次了,如果重复应用很多次的话以失去缓冲能力;第二是你的电流可能小了
,我刚做的时候也是这样,我当时还是用的100伏的电压,跑不动,而且条带很宽,模糊,后面把电流调到150伏。跑的可快了,而且也压成一个小条带了!
求助
western blot
maker出现的问题
答:
可能的原因有,
maker加的量少
,半干法转膜的时候转缓液加多了,maker没有保存好,如长期放在室温分解了,也可能是跑电泳的胶的问题。跑胶的时候电压越小条带相对弥散些,不过还不至于maker不清楚。
新手请教
Westernblot
问题,我的目的条带大概是10KDa,结果跑出来的条带...
答:
抗体是多抗么 或者洗的不干净有非特异性吸附 反正肯定不对啦那条带 10这么小的
跑胶
和转膜时间上都得控制好呢
western blot
试验中遇到的问题,希望能帮到
正在
苦恼的你~
答:
1.考虑没有完全变性,适当提高SDS浓度,同时延长煮沸时间。2.考虑蛋白浓度过高,加入缓冲液稀释。1. 电压:低电压下筛选效应充分,条带漂亮。2.
胶的
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胶越
均匀,条带越窄,分离越均匀。︶笑脸型:凝结冷却不均匀,中间冷却不好。︵皱眉状:可能凝胶和玻璃板底部有气泡。拖尾:样品溶解不...
Western blot
实验技术及常见问题分析?
答:
20
跑胶的
条带歪斜或者漂移?答:电转仪长期使用导致海绵变薄,“三明治”结构不紧凑导致,可更换或者在两块海绵之间垫上少许普通的草纸。 21转膜后膜上有单个或多个白点?答:转膜时确保膜和胶块之间没有气泡。 22转膜缓冲液过热?答:缓冲液中离子浓度太
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或者电压过高,转膜过程中注意降温。 23显影后胶片背景太...
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