做标准曲线首先有标准物质,然后有一个曲线的浓度范围。比如说,标准物质X,浓度是0.1mg/ml-2mg/ml。
配制样品的时候,取X适量,配制成浓度为10mg/ml的母液,然后逐级稀释,配制成浓度为0.1mg/ml,0.2mg/m,0.5mg/ml,1.0mg/ml,2.0mg/ml的样品,然后按照浓度由低到高的顺序进样分析。(由低到高是避免系统误差)
注意:这里是配制一份样品,稀释成若干线性用的样品。一般至少5个浓度。
然后可以在excel上形成散点图。然后添加趋势线,并且显示R2和公式。这个y=97.04x+0.0498就是这个线性公式,R2是相关系数,如下图所示:
扩展资料:
高效液相色谱法特点:
1、高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。
2、高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
3、高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
4、高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
5、应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
6、柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物
7、样品量少、容易回收:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。
参考资料来源:百度百科-高效液相色谱
参考资料来源:高效液相色谱怡
在色谱中,峰面积和浓度是成正比的。标准曲线就是一条横轴是浓度,纵轴是峰面积的曲线。
做标准曲线首先你的有标准物质,然后有一个曲线的浓度范围。
比如说,标准物质X,浓度是0.1mg/ml-2mg/ml。
配制样品的时候,取X适量,配制成浓度为10mg/ml的母液,然后逐级稀释,配制成浓度为0.1mg/ml,0.2mg/ml,0.5mg/ml,1.0mg/ml,2.0mg/ml的样品,然后按照浓度由低到高的顺序进样分析。(由低到高是避免系统误差)
注意:这里是配制一份样品,稀释成若干线性用的样品。一般至少5个浓度。
比如结果是:
浓度 峰面积
0.1 10
0.2 20
0.5 49
1.0 95
2.0 195
然后可以再excel上形成散点图。然后添加趋势线,并且显示R2和公式。这个y=97.04x+0.0498就是这个线性公式,R2是相关系数。我故意做的偏了一点。这个系数越接近1,你的线性做得就越准。
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