高效液相色谱仪标准曲线怎么做

如题所述

标准曲线首先有标准物质,然后有一个曲线的浓度范围。比如说,标准物质X,浓度是0.1mg/ml-2mg/ml。

配制样品的时候,取X适量,配制成浓度为10mg/ml的母液,然后逐级稀释,配制成浓度为0.1mg/ml,0.2mg/m,0.5mg/ml,1.0mg/ml,2.0mg/ml的样品,然后按照浓度由低到高的顺序进样分析。(由低到高是避免系统误差

注意:这里是配制一份样品,稀释成若干线性用的样品。一般至少5个浓度。

然后可以在excel上形成散点图。然后添加趋势线,并且显示R2和公式。这个y=97.04x+0.0498就是这个线性公式,R2是相关系数,如下图所示:

扩展资料:

高效液相色谱法特点:

1、高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。

2、高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。

3、高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

4、高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级

5、应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。

6、柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物

7、样品量少、容易回收:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。

参考资料来源:百度百科-高效液相色谱

参考资料来源:高效液相色谱怡

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第1个回答  推荐于2017-12-16

在色谱中,峰面积和浓度是成正比的。标准曲线就是一条横轴是浓度,纵轴是峰面积的曲线。

做标准曲线首先你的有标准物质,然后有一个曲线的浓度范围。

比如说,标准物质X,浓度是0.1mg/ml-2mg/ml。

配制样品的时候,取X适量,配制成浓度为10mg/ml的母液,然后逐级稀释,配制成浓度为0.1mg/ml,0.2mg/ml,0.5mg/ml,1.0mg/ml,2.0mg/ml的样品,然后按照浓度由低到高的顺序进样分析。(由低到高是避免系统误差)

注意:这里是配制一份样品,稀释成若干线性用的样品。一般至少5个浓度。

比如结果是:

浓度        峰面积

0.1            10

0.2            20

0.5            49

1.0            95

2.0            195

然后可以再excel上形成散点图。然后添加趋势线,并且显示R2和公式。这个y=97.04x+0.0498就是这个线性公式,R2是相关系数。我故意做的偏了一点。这个系数越接近1,你的线性做得就越准。

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第2个回答  2016-08-21

具体项目得具体分析。

大概就是说:物质X,配制一瓶母液,然后逐级稀释,配制出至少五个不同的浓度,然后分别进样分析。

我们都知道,液相的峰面积和浓度呈正比关系,进样之后,可以读出峰面积。把这些数据输入excel,形成一个散点图,横轴是你的样品浓度,纵轴是峰面积,就会形成一条直线。然后你要在图谱上显示趋势线、显示公式、尤其是要显示R2,一般相关系数R2越接近1,就说明你的线性做得越好。

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