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蛋白纯化填料是什么
蛋白纯化
的工作主要从事
什么
答:
只是
蛋白纯化
的话,做抗体、干扰素、核酸等蛋白物质的纯化工艺开发。可以延伸到蛋白药物上游、下游整个流程等
如何评价分离
纯化
方法的可行性
答:
疏水色谱:疏水色谱基于
蛋白质
表面的疏水区与介质疏水配体间的相互作用,在高浓度盐作用下,蛋白质的疏水区表面上有序排列的水分子通过盐离子的破坏被释放,裸露的疏水区与疏水配体相互作用而被吸附。疏水色谱就是利用样品中各组分在色谱
填料
上配基相互作用的差异,在洗脱时各组分移动速度不同而达到分离的...
为
什么
低盐上样,高盐洗脱
答:
为
什么
低盐上样,高盐洗脱 疏水作用层析为什么要低盐下柱?首先要了解其工作原理。盐溶度越高,蛋白的疏水性越强,越容易与疏水
填料
的配基结合。低盐下注,是因为蛋白疏水性弱,从而从柱子上洗脱下来。一般来说,疏水
纯化蛋白
,高盐上柱,逐渐降低盐浓度洗脱,这样就可以分离疏水性不同的蛋白了。
蛋白质
沉淀的定义及蛋白质沉淀的方法有哪些
答:
蛋白质
沉淀的定义:蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀(precipitation),变性蛋白质一般易于沉淀,但也可不变性而使蛋白质沉淀,在一定条件下,变性的蛋白质也可不发生沉淀。蛋白质沉淀的方法:盐析法 ——多用于各种蛋白质和酶的分离
纯化
;在蛋白质溶液中加入大量的中性盐以破坏蛋白质的胶体...
血红素
蛋白
镍柱
纯化
问题,多余的血红素会不会使镍柱失效
答:
血红素
蛋白
镍柱
纯化
问题,多余的血红素会不会使镍柱失效 流速过快的话,蛋白和镍柱的结合不够充分,一些结合的不牢的蛋白容易被冲洗下来,影响最终的收率。另外速度过快对于
填料
也是一种伤害,填料长期受压过大容易破碎失去柱效。流速过慢的话,蛋白结合的时间太长,增加了变性的风险。另外过慢的速度消耗的...
his
纯化蛋白
试剂盒为
什么
不能加edta
答:
EDTA会夺走
填料
中的金属离子,使亲和填料失去作用。如Ni NTA Beads,主要是NI离子可以和
蛋白
His标签结合,以
纯化
His标签蛋白,若加EDTA会影响蛋白和填料的结合,也会损坏填料。有兴趣可以加群讨论534967593
PALL混合模式层析
填料是什么
?
答:
HEP HyperCel 混合模式层析填料 颇尔公司的MEP HyperCel混合模式
填料是
一种灵活的层析填料设计,用于捕获和
纯化
从实验室到生产规模的抗体和各种重组
蛋白
。………详细资料请参考:混合模式层析:http://product.bio1000.com/100477/
镍柱
纯化蛋白
过程中流速过快或过慢有
什么
影响
答:
流速过快的话,
蛋白
和镍柱的结合不够充分,一些结合的不牢的蛋白容易被冲洗下来,影响最终的收率。另外速度过快对于
填料
也是一种伤害,填料长期受压过大容易破碎失去柱效。流速过慢的话,蛋白结合的时间太长,增加了变性的风险。另外过慢的速度消耗的时间太长,影响工作效率。
分子生物学中常用的tag
什么
意思
答:
以His-Tag
纯化
标签结合金属螯合亲合层析,为重组
蛋白质
的分离纯化提供了一个有力的工具。由于金属螯合亲合层析具有配体简单、吸附量大、分离条件温和、通用性强等特点,上样条件可选择范围广,在高盐、一定浓度的变性剂以及去垢剂的条件下,带6His纯化标签的蛋白质都可以和亲合
填料
特异性结合,逐渐成为...
关于植物油体
蛋白
表达
纯化
体系
答:
植物油体表达体系将目的
蛋白
的编码基因插入油体蛋白(oleosin)编码基因的3`端,以oleosin启动子驱动目的蛋白与oleosin一起在转基因植物的油体中特异表达,获得转基因植物种子后,将种子粉碎, 利用油体的疏水性,离心将油相和水相分开,回收上层油体部分,即可去除种子中大部分的非目标成分,从而显著降低目的蛋白的分离
纯化
...
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