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琼脂糖凝胶电泳碱性
电泳和聚丙烯酰胺
凝胶电泳
的区别
答:
DNA电泳一般使用的都是
琼脂糖凝胶电泳
,电泳的驱动力靠DNA骨架本身的负电荷.聚丙烯酰氨(PAGE)凝胶电泳用于蛋白质与寡糖核苷酸的分离.电泳的驱动力靠与蛋白质结合的SDS上所携带的负电荷.蛋白质电泳(一般指SDS-PAGE)根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白.蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小...
求Thermo的RevertAid First strand cDNA Synthesis kit试剂盒的中文说 ...
答:
碱性琼脂糖凝胶电泳
分析标记[32P] 的第一链cDNA合成产物可以用碱性琼脂糖凝胶电泳分析。同样,合成产物和所用的DNA marker 都要[32P]标记。① 制备1.4% 琼脂糖凝胶(30mM NaCl, 2mM EDTA),在
碱性电泳
缓冲液(30mM NaOH, 2mM EDTA)平衡至少1h。② 标本抽样(1x105 dpm),转移到一个单独的管子中,5μl水稀释。
制作
琼脂糖凝胶
时候为什么要加TBE 缓冲剂??
答:
用水的话会使得凝胶电阻很大,
电泳
过程中电流小、发热量大,DNA泳动效率低。所以配制
琼脂糖凝胶
一定要用缓冲液配制。里面的离子可以作为电导体。
如何选择
琼脂糖凝胶
的浓度来分离DNA
答:
总体原则是:分子量大的DNA,
电泳
时使用浓度较小的
凝胶
反之亦反。胶浓度越大,电泳速度越小;若胶浓度偏高,可能跑不动,条带缩在一起;若胶浓度过低,可能跑得太快,同样分不开。可参考下面的对应关系:凝胶浓度(%) 线性DNA长度(bp)0.5 1000~30000 0.7 800~12000 1.0 500...
琼脂糖凝胶电泳
是定性还是定量
答:
定性。凝胶电泳的结果是定性的,即只能确定样品中有无目标分子,而无法确定其准确的浓度或数量。在
琼脂糖凝胶电泳
中,DNA或蛋白质经过电泳分离后,通过对比不同样品的带型尺寸、形态等特征,可以初步判断样品中有无存在目标分子,并可以进行初步的分子大小估计。但由于不同样品中的目标分子含量和纯度不同,...
琼脂糖电泳
DNA迁移速度是如何排序的?
答:
质粒DNA
琼脂糖凝胶电泳
中质粒超螺旋、开环、直链跑胶快慢次序依次是超螺旋、直链、开环。琼脂糖凝胶电泳DNA 迁移速率与分子大小和构象相关,分子构象越大,摩擦阻力越大,第一条带是超螺旋带应该最亮,因为超螺旋结构完整紧密,跑得最快。第二条带为直链线性质粒是双链都断开变成松弛的线性DNA,不如...
请问
凝胶电泳
和
琼脂电泳
有什么区别?
答:
当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶染色,在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外,还可以从电泳后的凝胶中回收特定的DNA条带,用于以后的克隆技术操作。常用的凝胶电泳包括
琼脂糖凝胶电泳
和聚丙烯酰胺凝胶电泳 琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳...
琼脂糖电泳
从哪个极到哪个
答:
其原理是基于电场作用下带电粒子会朝与其带电性质相反的电极方向移动的特性。在琼脂糖
电泳
中,样品被放置在负极,然后施加电场。由于DNA等分子带有电荷,它们会在电场的作用下从负极向正极移动。因此,琼脂糖电泳中的分子是从负极迁移到正极的。这种现象主要是由于
琼脂糖凝胶
作为介质的导电性不强,分子在...
在做
琼脂糖凝胶电泳
时,如果胶的浓度不合适,会发生什么情况
答:
一般要根据要
电泳
分离的核酸的分子量大小:分子量大的核酸电泳时使用浓度较小的
凝胶
,分子量小的核酸电泳时使用浓度较大的凝胶.核酸在浓度越大的凝胶中电泳速度越小.如果胶浓度偏高,可能跑不动,如果胶浓度偏低,可能跑得太快,分不开.可以查到核酸分子大小与
琼脂糖
浓度范围的对应关系.
什么是
电泳
技术
答:
其中聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大,对一般蛋白质不起分子筛作用,但适用于分离同工酶及其亚型,大分子核酸等应用较广,介绍如下: ⒈
琼脂糖凝胶电泳
的原理概述琼脂糖是由琼脂分离制备的链状多糖。其结构单元是D-半乳糖和3.6-脱水-L-...
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