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核酸电泳液全是气泡
电泳
法简介
答:
取琼脂糖约0.2g,加水10ml,置水浴中加热使溶胀完全,加温热的醋酸-锂盐缓冲液(pH3.0)10ml,混匀,趁热将胶液涂布于大小适宜(2.5cm×7.5cm或4cm×9cm)的玻璃板上,厚度约3mm,静置,待凝胶结成无
气泡
的均匀薄层,即得。 (2) 标准品
溶液
及供试品溶液的制备 照各药品项下规定配制。 (3) 点样与
电泳
在电泳槽内加...
PCR产物的检测方法有哪些?都有什么原理
答:
(2)加样和
电泳
上下槽中加入1×TBE电泳缓冲液,溢过加样孔,拔出梳子,排出加样孔中的
气泡
,将PCR产物或限制性内切酶消化产物2与1上样缓冲
液
混匀,用微量注射器加入加样孔底部,使样品在孔底成一层,两侧孔中加入标准分子量的DNA Marker。以2-10V/cm电压电泳,电泳时间足够长,使片断足以分开,...
pcr反应正确过程
答:
2.按照试剂盒说明书设置反应时间和温度,扩增结束后电泳鉴定 3.琼脂糖
核酸电泳
· 将电泳所用器具蒸馏水洗净,架好梳子 · 根据要分离的 DNA 片段大小制备合适浓度的琼脂糖凝胶,准确称取一定的琼脂糖加入到锥形瓶中,加入 30ml 左右的电泳缓冲液(TAE 或 TBE)· 在微波炉中加热融化后冷却至 40℃...
电泳
无DNA条带,什么原因?
答:
用移液器吸取少量融化的琼脂糖凝胶封橡皮膏内侧,待琼脂糖
溶液
凝固后将剩余的琼脂糖小心地倒入胶槽内,使胶液形成均匀的胶层。倒胶时的温度不可太低,否则凝固不均匀,速度也不可太快,否则容易出现
气泡
。待胶完全凝固后拨出梳子,注意不要损伤梳底部的凝胶,然后向槽内加入0.5×TBE稀释缓冲液至液面恰好...
电泳
胶板怎么做
答:
3 按待分离DNA,配制相应浓度琼脂糖,100℃水浴加热至琼脂糖融化均匀;4 用吸管取少量琼脂糖凝胶
溶液
将
电泳
胶模四周密封好,防止浇灌琼脂糖凝胶板时发生渗透。待琼脂糖凝胶冷却至50℃左右时,加入6μl
核酸
染料,摇匀,轻轻倒入电泳胶模中,琼脂糖凝胶的厚度在3~5mm。倒胶时要避免产生
气泡
,若有气泡...
DNA测序的测序技术
答:
② 灌制凝胶的过程中要严防产生
气泡
,否则影响测序的结果。四、
电泳
1. 预电泳(1)当凝胶聚合完全后,拨出鲨鱼齿梳,将该梳子反过来,把有齿的一头插入凝胶中,形成加样孔。(2)立即将胶板固定在测序凝胶槽中,一般测序凝胶槽的上下槽是分开的,因而只有在固定好凝胶板后,方能加入TBE缓冲液。(3)稀释10×TBE缓冲液至...
双向
电泳
的常见问题
答:
同时可以在相邻的空
电泳
槽里,也加入适量(80 %满)的覆盖油。跑第一向时,为什么要设定一个电流的最大值电压(50 μ A/ 胶)?电流的平方和功率成正比。电流增大,功率增大,放出的热量也随之增大,就会导致胶条的温度增加。当温度超过 30 摄氏度时,缓冲液里的尿素就容易解离,产生一些极性分子...
纯化dna的方法有哪些
答:
纯化DNA的常用方法是用酚抽提-乙醇沉淀法,适用于普通实验室操作。它通过交替使用苯酚、氯仿两种不同的蛋白质变性剂,可以增加去除蛋白质杂质的效果;氯仿可以去除
核酸溶液
中的微量酚,还可以加快有机相与液相混合,去除色素和蔗糖;在氯仿中加入少量的异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的
气泡
。【实验...
什么是“化学”
视频时间 02:56
琼脂糖的
电泳
技术
答:
3.
电泳
方法(1)凝胶类型用于分离
核酸
的琼脂糖凝胶电泳可分为垂直型及水平型(平板型)。水平型电泳时,凝胶板完全浸泡在电极缓冲液下1-2mm,故又称为潜水式。目前更多用的是后者,因为它制胶和加样比较方便,电泳槽简单,易于制作,又可以根据需要制备不同规格的凝胶板,节约凝胶,因而较受欢迎。(2)缓冲液系统缺少离子时...
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