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wb蛋白放几度
wb蛋白
煮沸后能放-40保存吗
答:
wb蛋白煮沸后不能放-40保存
。蛋白基本上都比较容易降解,室温过夜肯定会有很多降解,4℃过夜也会有少量降解,在-20℃最多也只能存放一周,长期保存一般放在-80℃或更低。
wb蛋白
煮样温度
答:
wb蛋白煮样温度为100摄氏度
。westernblot实验中,研究纯化的蛋白,用100摄氏度,煮5min,若研究细胞样品的膜蛋白,用膜蛋白抽提试剂盒做目的蛋白的富集,用100摄氏度,煮5min。WB,蛋白质印迹又称免疫印迹,是采用印迹技术将蛋白质转移到膜上,根据抗原-抗体的特异性结合,检测复杂样品中的某种蛋白的方法...
做western blot 实验,怎么煮
蛋白
答:
如果是研究纯化的蛋白,可以用100℃
,煮5min就行;如果是研究细胞样品的膜蛋白,可以用膜蛋白抽提试剂盒先做目的蛋白的富集,而后同上处理。
wb四度
过夜时需要震荡吗
答:
WB全称WesternBlot蛋白质印迹。
4度拿出后
,我一般会在室温下摇床上放置半小时到一小时,然后进行后续的操作。但如果目的蛋白丰度高、抗体好用,不需复温应该也可以。
wb
牛奶封闭温度
答:
室温、
4度
或着37度的封闭时间。
1、如果是封闭时一般用5%脱脂wb牛奶,封闭温度为室温1-2h
。2、如果是wb牛奶用1-5%BSA或1%无蛋白封闭液,需要封闭温度为4度,并过夜。3、如果wb牛奶全部用PBS稀释,封闭温度为37度,半个小时就可以。
蛋白
上样缓冲液室温能放多久
答:
一个月。保存在缓冲液室中的蛋白相当稳定,
4度
下一个月之内基本上没有降解,以前做WB结果比较好的话,直接上样就可以了。蛋白又名鸡子白,异名鸡卵白(《别录》)、鸡子清(《食疗本草》),为雉科动物家鸡的蛋白,是常见的食品,营养优良、润肺利咽、清热解毒。
超详细
蛋白质
印迹(Western Blotting,
WB
)方法介绍
答:
蛋白质
印迹(Western Blotting,
WB
):精密分析蛋白质的科学旅程 蛋白质,这些生命活动中的关键分子,其电泳行为受电场、等电点和分子特性影响。通过SDS和还原剂的巧妙运用,我们得以揭示它们的秘密,将变性和非变性电泳技术如PAGE、琼脂糖电泳和等电聚焦电泳推向了蛋白质分析的前沿。其中,蛋白质印迹技术就...
wb
电泳液能放多久
答:
2-3个月。
WB
电泳液需要在4°C下保存,储存条件良好的话WB电泳液可以稳定保存2-3个月,所以
wb
电泳液能放2-3个月。WB电泳液是用于
蛋白质
电泳实验的缓冲液,其保存时间可能会因配方、pH值、保存温度等因素不同而有所差异。
蛋白
电泳
WB
中的重复利用问题
答:
电泳液和转膜液都可重复利用3次左右 考马斯亮兰染液也可以重复用。新配的染液10分钟即可,重复3次后要染30分钟。一抗二抗可以重复利用,但是注意要在5%milk中加入0.2% sodium azide ,并且用完以后放入
4度
保存,我的经验重复使用4-5次是肯定没有问题的.如果保存不当,就会污染微生物,只能丢弃....
从-80度冰箱取出的
蛋白
怎么做
wb
答:
从-80度冰箱取出的
蛋白
要做Western Blot实验,需要先进行组织蛋白的提取和总蛋白的测定。一、组织蛋白的提取:1. 准备组织细胞裂解液,将1000ul RIPA和10ul PMSF加入到1.5ml EP管中,充分混合。如果发现RIPA有沉淀,可放室温半小时或常温水域使其溶解。如果PMSF为粉剂,将其配置成100 mM液体备用。2....
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