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wb电泳缓冲液配方
WB
蛋白
电泳
实验步骤,液体的配置及相关问题解答
答:
1. 试剂配置与选择电泳液:
以100ml为基准,准备Tris 3.03g, 甘氨酸 18.8g, SDS 1g。转膜液: Tris 3.03g, 甘氨酸 14.4g, 800ml
ddH2O和200ml甲醇混合。TBST(10×): Tris 12.1g, NaCl 40g, 500ml ddH2O。2. 实验步骤详解a. 配制和制胶使用雅酶配胶盒,根据样本选择胶浓度:7.5%(30kD...
求western blot
电泳液
和转膜
缓冲液
的
配方
~~谢谢啦~~ 有的转移缓冲液加...
答:
5*SDS-PAGE电泳缓冲液
0.125M tris 15.1g, 1.25M glycine 94g,0.5% SDS 5.0g,加入800ml去离子水,搅拌溶解
。加去离子水将溶液定容至1L后,室温保存。用的时候稀释成1*的就可以了。转膜缓冲液的配制方法:39mM glycine 2.9g,48mM tris 5.8g, SDS 0.37g 加入600ml去离子水,充分搅拌溶...
wb
实验是什么?
答:
wb
的实验步骤 制样:裂解
缓冲液
或者超声处理。(使用RIPA裂解液是需按照100:1加入蛋白酶抑制剂)。
电泳
:根据蛋白大小确定合适的PAGE胶浓度,推荐上样量为20-30ug总蛋白。转膜:湿转和半干转都可。但在待检测蛋白分子量较大或低内源水平湿转移方法更佳。洗膜:10min/次*3次。封闭:含5%脱脂奶粉的TBST中...
wb
跑
电泳
跑到什么位置合适
答:
1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。2、
匀浆缓冲液
:
1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.0ml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml
。3、转膜缓冲液:甘氨酸 2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容至1000ml。4、0.01M PBS(pH7.4):NaCl 8.0g;KCl 0.2g;Na2HPO4 ...
wb电泳液
干粉成分是什么
答:
Tris-base等。
wb电泳液干粉主要成分为Tris-base、甘氨酸和SDS
,用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验(SDS-PAGE)中的电泳缓冲试剂。
wb
曝光液一条带加多少
答:
后面的蓝色条带是二甲苯氰,它在1%和1.4%琼脂糖中
电泳
时,其迁移速率分别与2Kb和1.6Kb的双链线性DNA大致相似。而对于PAGE胶他们的迁移速率也分别不同。只要我们知道要配制的
缓冲液
的pH,经查表便可计算出所用缓冲剂的比例和用量。例如配制500nmpH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。
wb
实验原理
答:
3.加入1XSDS样品
缓冲液
,刮落细胞,转移到Ep管。注意:冰上操作。4.超声10~15秒剪切DNA以减低样品粘性。5.煮沸样品5min。6.离心12000g,5min,取上清。SDS-PAGE
电泳
一、清洗玻璃板 二、灌胶与上样 1.玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶。2.配10%分离胶,加入TEMED后...
平时实验没有做成功|我成功了做实验
答:
1)将
缓冲液配方
中的成分分别以10-100倍配成母液储存,需要的时候只需将相应的母液混合,补加水稀释即可 2)配培养基时通常会忘记各成分的量,如配LB时的三个成分不记得到底哪个是5g,哪个要10个,因此可以在常用的试剂瓶的标签上注明所需的量,如配LB时,在NaCl瓶外注明10g/L,yeast 5 g/L, tryton 10 g/L等,...
wb
添加的上样
缓冲液
的量是多少
答:
缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e->2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e->2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变。
电泳缓冲液
的另一个...
wb电泳液
sds加多了
答:
SDS在蛋白
电泳
中的作用是变性,即将所有蛋白质的性状都变成短棒状,这样在电泳时候就不用考虑蛋白分子性状及电荷的问题了。上层胶主要作用是聚集,使蛋白在相同起跑线开始在分离胶中抛开。所以SDS加多了影响应该问题不大。
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