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质粒基因组污染
质粒污染
的原因有哪些?
答:
1. 实验室操作不规范:在实验室中,如果操作人员没有严格遵守无菌操作规程,可能会导致细菌、真菌等微生物的污染。此外,如果在提取、纯化质粒的过程中使用了未经消毒的试剂或设备,也可能导致
质粒污染
。2. 实验材料受到污染:实验中使用的试剂、培养基、耗材等物品如果没有经过严格的无菌处理,可能会携带...
质粒
提取过程中有哪些注意的问题。
答:
以常见的试剂盒提取为例:1.菌的活性:如果菌种过久或保存不当,
质粒
拷贝数可能会很低,影响最终的浓度;2.
基因组
DNA
污染
:在碱裂解时,如果溶液配制或体积不对,或剧烈震荡,会带入基因组dna;3,蛋白污染:碱裂解后,需高速离心,如果时间或转速不够,蛋白没有完全沉降,或吸取上清时混入沉淀,会带来...
【求助】如何去处
质粒
中的
污染
答:
蛋白质污染可以用酚氯仿重新来抽提,RNA污染可以用RNA酶去除RNA,
基因组
DNA污染可以在质粒抽提时注意点就可以避免了,不好去除基因组DNA,要么就胶回收来去除DNA.如果时手工法提的质粒,建议换试剂盒来提,这些都可以避免的。1.估计培养皿的"浑浊"现象是细菌.2.如果是
质粒污染
的话,电泳就能检测出来.3...
质粒
中
基因组污染
是怎么产生的?
答:
基因组
的产生一般是因变性和中和步骤处理不当所致。如果为了提高混合效果,混匀的动作过于剧烈,基因组DNA可能被剪切成小片段,这些小片段在后来中和过程中被复性,保留在溶液中,与质粒一起回收出来了。要降低基因组的污染,记注两点:混合动作要温和,细胞用量要合适。
抽提的
质粒
DNA电泳时怎么出现
基因组
DNA的
污染
?
答:
(1)菌体裂解和中和过程中,剧烈混合造成
基因组
DNA断裂所致。解决方法:温和地进行菌体的裂解和中和。(2)加Solution II时操作时间过长,造成基因组DNA断裂所致。解决方法:将裂解步骤控制在5分钟内完成。(3)细菌的质量差(反复冻融的细菌,陈旧的细菌,培养条件不合适的细菌等)中有许多断裂或降解而游离的...
怎样避免
质粒
提取
基因组
DNA
污染
答:
加溶液2后不要剧烈摇晃,溶液2处理时间不能太久,一般颠倒6-8次即加溶液3中和,这都是为了避免碱裂解
基因组
;加溶液3后要混合充分,离心后取上清小心不要吸到白色沉淀,那里有组蛋白包着的基因组DNA。脱氧核糖核酸(英语:Deoxyribonucleic acid,缩写为DNA)又称去氧核糖核酸,是一种分子,双链结构,...
质粒
会被细菌
污染
吗
答:
质粒会被细菌污染。根据查询相关资料信息,
质粒污染
是蛋白质、RNA和
基因组
DNA的污染,质粒暴露在外界环境下,会有细菌侵蚀附着污染。质粒存在于细胞质,具有自主复制能力。
在做酶切时不小心用
质粒污染
了酶,那酶还能用吗
答:
可能是复制中间体。还有一条和你的
质粒
大小一样的,跑不动又模糊一片的。最好的质粒提取出来只有一条超螺旋的带,就是
基因组污染
。看上去,你的质粒都没啥问题,你要根据marker确定你的质粒大小,有不少线性质粒,你得先知道你的质粒到底有多大首先,就是提取质粒的时候力道有点大,然后对比marker看...
在
质粒
提取过程中,如何避免染色体dna
污染
?为什么
答:
加入裂解液的时候颠倒混匀的动作幅度太大,会导致
基因组
DNA断裂成小片段,和
质粒
混在一起。沉淀以后,吸取上清液的时候不小心吸入沉淀,会把夹在沉淀中的基因组DNA也一起吸入硅胶吸附柱,这一步的可能性更大,通常都是这一步混入的基因组DNA。
阴性质控品失控的原因
答:
扩增产物污染,标本交叉污染,
基因组
DNA或
质粒
的污染。1、扩增产物污染:扩增后的PCR管意外开盖,这是PCR实验中最常见最主要的污染问题。2、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染。3、
基因污染
是指在天然...
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