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质粒提取基因组污染怎么识别
试剂盒通过什么原理区分
基因组
和
质粒
答:
碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法
,其原理为:染色体DNA比质粒DNA分子大得多,且染色体DNA为线状分子,而质粒DNA为共价闭合环状分子;当用碱处理DNA溶液时,线状染色体DNA容易发生变性,共价闭环的质粒DNA在回到中性时即恢复其天然构象;变性染色体DNA片段与变性蛋白质和细胞碎片结合形成沉淀,...
质粒提取
过程中有哪些注意的问题。
答:
以常见的试剂盒提取为例:1.菌的活性:如果菌种过久或保存不当
,质粒拷贝数可能会很低,影响最终的浓度;2.基因组DNA污染:在碱裂解时,如果溶液配制或体积不对,或剧烈震荡,会带入基因组dna;3,蛋白污染:碱裂解后,需高速离心,如果时间或转速不够,蛋白没有完全沉降,或吸取上清时混入沉淀,会带来...
大肠杆菌
基因组DNA提取
和
质粒DNA提取
的异同点
答:
提取的步骤基本上都属DNA的提取步骤,包括细胞裂解,DNA释放,纯化,最后沉淀溶解.
质粒提取
过程中,有一个DNA变性、复性的过程,这个与基因组提取完全不同,这是利用质粒是以超螺旋结构存在于大肠杆菌中的特殊状态,分离纯化质粒时总是会利用这个特点来分离
基因组DNA
与
质粒DNA
.
质粒DNA提取
和细胞
基因组DNA提取
的异同
答:
不同点:提取方法:质粒DNA主要采用CTAB法
,物理方式包括玻璃珠法、超声波、研磨和冻融,化学方法有异硫氰酸胍法和碱裂解法,还有酶法;而细胞基因组DNA提取则更为广泛,需要考虑核酸完整性、有机溶剂和金属离子的控制,以及去除其他生物大分子和RNA。提取原理:质粒DNA提取涉及三种特定溶液和硅酸纤维膜,过...
如何
判断
提取质粒DNA
的纯度
答:
可以通过紫外吸收检测
。因为核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm得OD值的比值,估计核酸的纯度。纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0。若比值高于1....
质粒DNA提取
和细胞
基因组DNA提取
的异同
答:
一、提取方法不同
DNA提取
主要是CTAB方法,其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法。生物方式:酶法。
质粒抽提
方法即去除 RNA,将质粒与细菌
基因组
DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒。二、提取原理不同
质粒DNA
提取用到三种...
质粒dna
的
提取
与细菌
基因组dna
的提取实验的区别在哪儿
答:
质粒
基因组DNA提取
与其他生物基因组DNA提取有主要的异同。
质粒DNA
提取一般用沸水浴法和碱裂解法,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用,它主要是将细胞内的环状
质粒提取
出来,一般需要用SDS裂解,RNA酶降解,然后过柱,再进行洗脱.过程比较简单。而基因组DNA提取则较为复杂,也需要用SDS裂解和RND酶降解,但...
大肠杆菌
基因组DNA提取
和
质粒DNA提取
的异同点?
答:
提取的步骤基本上都属DNA的提取步骤,包括细胞裂解,DNA释放,纯化,最后沉淀溶解。
质粒提取
过程中,有一个DNA变性、复性的过程,这个与基因组提取完全不同,这是利用质粒是以超螺旋结构存在于大肠杆菌中的特殊状态,分离纯化质粒时总是会利用这个特点来分离
基因组DNA
与
质粒DNA
。
如何
证明控制某种细菌性状的基因是在
质粒
上还上在核
基因组
上?
答:
提
质粒
,不要有菌体
基因组
的
污染
,以质粒为模板,利用该基因特异引物PCR检测。若有条带的产生则证明在质粒上 如无,则间接证明在核基因组上
基因组提取
和
DNA
的提取有什么不一样额?
答:
你是要问
提取基因组
DNA和
提取质粒
DNA有什么不一样么?差别就是,质粒是环状的,可以通过碱变性,酸变性再用氯仿等与基因组和蛋白分离出来。而基因组不能经过酸碱变性复性,因为会解链合不上,
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