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大肠杆菌扩增目的基因
以
大肠杆菌
质粒DNA为载体克隆一个
目的
蛋白质
基因
,并使之在大肠杆菌中...
答:
大肠杆菌
是原核生物,
目的
蛋白质
基因
如果是原核生物的基因:经测序正确后,利用PCR
扩增
该基因,酶切连接到质粒,转化大肠杆菌筛选阳性克隆,鉴定正确后诱导表达。通常是用IPTG诱导 目的蛋白质基因如果是动物基因是真核基因,直接用限制酶切获得的基因在大肠杆菌内表达会错误,应该选择动物的相应基因的mRNA反...
基因
克隆有哪些步骤,如何筛选阳性克隆
答:
扩增目的基因
,比如通过PCR的方法。PCR扩增的序列可以通过酶切或者TOPO TA的方法插入到载体质粒。转染
大肠杆菌
筛选阳性克隆一般常采用蓝白克隆方法,就是在载体上,序列的插入位置本来是一个完整编码β-gal这个酶的序列,如果不被破坏,产生的酶可以降解细菌培养盘上的底物,形成蓝色产物。如果有目的序列插...
如何将
基因
导入
大肠杆菌
进行
扩增
的实验
答:
确定
目的基因
之后,必须先连接到带有抗性基因的质粒上,之后通过转化导入感受态细胞中,涂板子筛选阳性单克隆。
高中生物:基因工程中将
目的基因
导入
大肠杆菌
和酵母菌中的目的是什么
答:
将
目的基因
导入
大肠杆菌
和酵母菌是为了让目的基因得以表达,我们知道,基因的作用是传递遗传信息,而遗传信息的表达就是通过转录等生成特定的蛋白质,而蛋白质就是生物表达其生物特性的基础。也就是说,只有目的基因通过传染进了
目的菌
体,通过寄主的蛋白质表达系统,才能生成目的蛋白,进而表现目的性状,如抗...
当质粒转化进
大肠杆菌
时,通过什么原理表达
目的基因
答:
当质粒转化进
大肠杆菌
时,通过DNA复制原理表达
目的基因
。CaCl2对特定的大肠杆菌处理,制备感受态的细菌。这些细菌可使每微克超螺旋质粒DNA,如一些插入目的DNA片段的重组质粒,产生5×106~2×107 个转化的菌落。当质粒与这些大肠杆菌混合后,质粒粘附在大肠杆菌的表面,在42℃的温度时,大肠杆菌出现热休克,...
有人找公司合成过
目的基因
吗?拿到克隆了目的基因的载体后,能否直接导 ...
答:
合成的
基因
一般是放在质粒载体中的,只要有特异引物直接 PCR
扩增
就可以了。不用导入Ecoli啊
请问用PCR克隆已知基因的步骤中为何要将回收的
目的基因
重组在
大肠
...
答:
1、这是作为保藏的手段,不然你怎么保存你的
基因
?2、这是获得自引物之间完整序列的必要途径,因为测序是无法获得待测序列起始部分和约800-1000bps之后的序列,因此需要连接到质粒上测序,俗称TA克隆。为什么会这样我就不说了,懒得打字。
如图表示利用
基因
工程培育抗虫棉的过程,请据图回答下列有关问题:(1...
答:
破坏了质粒中的氨苄青霉素抗性基因,但没有破坏四环素抗性基因,所以可以含有四环素的培养基来进行筛选.(3)由于
大肠杆菌
的繁殖快,周期短,因此将重组质粒导入大肠杆菌可以
扩增目的基因
.(4)将目的基因导入微生物细胞时,常采用感受态细胞法,即用氯化钙溶液处理细菌细胞,以增大细菌细胞壁的通透性,使之...
为什么将
目的基因
导入微生物需要用人工培养的
大肠杆菌
?
答:
大肠杆菌
它是具有很多优势的。首先它的繁殖比较快,可以以20分钟一代的速度指数型增长。这样的话,可以快速得到
目的
,
基因
的产物。另外的话,大肠杆菌能够在培养基上培养,并且只要在普通的lb培养基中就能生存能力很好,这样的话也可以获得目的蛋白比较可观的产量。虽然如此,但是我还是想说一说大肠杆菌的...
基因工程为什么要
目的基因
通入
大肠杆菌
细胞,直接通入受体细胞可以吗_百 ...
答:
通常叫
目的基因
导入受体细胞。一般来讲在基因工程的操作,有的是为了创造出整合新基因,有的是为了克隆蛋白获得高表达的产物以达到纯化鉴定的目的。细菌如
大肠杆菌
是原核生物的一种,其集中的DNA区叫拟核,还有质粒DNA。通常是将用同种限制性内切酶切割的目的基因和质粒载体进行连接,这是为了克服不亲和的...
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