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将目的基因导入大肠杆菌的方法
目的基因导入
微生物
的方法
答:
将目的基因导入微生物的方法是:Ca2+处理法(感受态细胞法或CaCl2法)
。主要原理就是通过处理使细胞的通透性变大,使得细胞膜表面出现一些孔洞,便于外源基因或载体进入感受态细胞。由于细胞膜的流动性,这种孔洞会被细胞自身所修复。例子:大肠杆菌的转化实验 ...
可以采用哪些
方法将基因转移到大肠杆菌
中
答:
利用基因工程技术可以将外源基因转入大肠杆菌中
。过程:第一步:用限制性核酸内切酶(简称内切酶)切割所需要的外源基因(也称为目的基因),并提取出来。第二步:将大肠杆菌里的质粒提取出来,并用内切酶切割出切割点,随后将目的基因+DNA连接酶连接上去(就像你缝衣服一样)。第三步:把质粒导入大肠杆菌...
将
基因导入大肠杆菌的
载体有哪些
答:
把目的基因导入大肠杆菌最常用的还是大肠杆菌质粒
,如pBR322、pUC(18/19)等,把环状质粒切开,再把它和目的基因连接上。用氯化钙诱导大肠杆菌成为感受态细胞,把重组的给弄进去了。用温和型噬菌体直接侵染得到含目的基因的噬菌体概率低
将目的基因导入大肠杆菌
前需用___处理,使细胞通透性___( 增大/减小...
答:
将目的基因导入大肠杆菌
前需用__Ca+__处理,使细胞通透性_增大_( 增大/减小 ),变为_感受态_细胞。
下列关于
基因
工程的叙述中,错误的是()
答:
基因工程常用的运载体包括质粒、噬菌体和动植物病毒等,故A正确;
把目的基因导入大肠杆菌时最常用的方法是钙离子处理法
,故B正确;转基因羊在培育过程中运用了动物细胞培养和胚胎移植等技术,故C正确;基因治疗是把正常的外源基因导入到有基因缺陷的细胞中发挥作用,以达到治疗疾病的目的,并不能剔除基因...
用钙离子处理
大肠杆菌
,可提高
基因的导入
率
答:
大肠杆菌
细胞最常用的转化
方法
是:首先用钙离子处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(本质上是使细胞壁的通透性增加),这种细胞成为感受态细胞。第二步是将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子(即提高
基因的导入
率),完成转化...
如何将
基因导入大肠杆菌
进行扩增的实验
答:
确定
目的基因
之后,必须先连接到带有抗性基因的质粒上,之后通过转化
导入
感受态细胞中,涂板子筛选阳性单克隆。
将目的基因导入大肠杆菌
需要先在体外构建基因表达载体?
答:
在体外构建基因表达载体主要是指
将目的基因
与载体(一般以质粒居多)连接,形成的重组DNA才能
导入大肠杆菌
,它能在大肠杆菌细胞内复制和表达。用Ca2+处理,我学的是用Ca2+处理
大肠杆菌的
细胞壁,增大细胞壁的通透性,便于重组DNA分子导入大肠杆菌细胞。所以这两个应该是同一个
方法
的两个步骤。
如何利用
大肠杆菌
做寄主进行DNA克隆并使外源
基因
得到表达
答:
将目的目的基因
克隆在载体质粒上,然后将载体质粒
转入大肠杆菌
中,选择成功转入质粒的大肠杆菌进行培养,就可诱导
目的基因的
表达了
将目的基因导入
受体细胞
的方法
有哪些
答:
常用方法:基因工程中常用的受体细胞有
大肠杆菌
,枯草杆菌,土壤农杆菌,酵母菌和动植物细胞等。其中,对于细菌或植物细胞,常用质粒作为载体将目的基因导入细胞内;动物细胞则用显微注射
的方法将目的基因导入
动物受精卵的雄性原核中。过程:用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞,主要是借鉴细菌或病毒...
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