大肠菌群平板计数法怎么做?

如题所述

用无菌吸管吸取稀释度样品1 mL,然后将其放入无菌培养皿中,再加入温度于 45℃下的CDLJ JD 显色培养基中10 mL的量,并进行培养皿中溶液均匀混合,可以通过快速转动培养皿的方式,等溶液凝固以后,加入5 mL左右 ,使其均匀覆盖平板表面,凝固后翻转培养基,在37℃培养24h左右。

然后观察其形态,颜色等变化。除此之外,平行设置两个稀释度培养基,步骤是先稀释样本,通过稀释后,微生物可以分散为单个细胞,然后进行一定环境条件下培养,直到其长成菌落为止,然后进行计算大肠杆菌的数量,通过稀释度和样本数量进行计算

平板计数法操作简便,较适用于菌体大小和质量都相近的类群,如细菌、酵母菌等的计数。但它只能测定那些可培养的微生物,而且干扰因素很多,且采用的培养基或培养条件有选择性,难以平等地区分所有的微生物。

扩展资料:

发酵法检测大肠杆菌;可以进行统计学估计原来样品中的菌落。主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等,要点有:

1、在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养,该培养基含有荧光底物,需要培养 24 h。

2、对荧光底物进行释放,需要采用葡萄糖醛酸进行,让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。

参考资料来源:百度百科—平板计数法

参考资料来源:百度百科—大肠杆菌

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第1个回答  推荐于2019-10-26

1、制备样品稀释液,吸取1mL加入到平板中,倾注55度左右的已灭菌的VRBA琼脂15-20mL,凝固后36度24小时培养,计数紫红色菌落

2、再将合适稀释度的VRBA平板上的紫红色菌落转接10支BGLB,统计阳性率

3、再将计数的VRBA结果X阳性率X稀释度,就是最终结果。

【大肠菌群】:

大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。其定义为需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胚杆菌,一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌等。大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一,目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。

【对人体的危害】:

大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。

大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的,主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。大肠菌群数的高低,表明了粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小。粪便是人类肠道排泄物,其中有健康人粪便,也有肠道患者或带菌者的粪便,所以粪便内除一般正常细菌外,同时也会有一些肠道致病菌存在(如沙门氏菌、志贺氏菌等),因而食品中有粪便污染,则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性,潜伏着食物中毒和流行病的威胁,必须看作对人体健康具有潜在的危险性。

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