第1个回答 2022-07-07
买回来的冻干菌种需要复苏，复壮，鉴别后才可以进行传代保存，为什么呢？因为冻干管里的菌种长期在低温环境中菌种能力会衰退，如果不复活，时间长了菌种会出现变异、死亡等问题，所以需要定期进行复活分离再保存
一：复活
消毒液消毒安瓿，用砂石在三分之一处划出刮痕后再消毒一次，把干燥灭菌后的纱布包住安瓿，手用力沿着刮痕处掰开，用无菌吸管吸取0.5ml培养基加入安瓿内摇匀，再全部吸取安瓿内的液体加入培养基中培养观察，如果不长菌，细菌延长至7天，真菌延长至14天
二：复壮
把上诉的菌液加入到合适的培养基中培养，使其能力恢复
三：菌种确认
菌种复壮后需要分离纯化，利用革兰染色法放在显微镜下观察其细胞形态，验证是否是相对应的菌种
四：菌种传代保存
确认其目标菌种后挑取可疑菌加入无菌水中混匀制成菌液，再加入等体积百分之20甘油的TSB大豆液体培养基中，分装保存在-30～-80摄氏度的环境中