PCR扩增后没有条带是怎么回事

如题所述

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第1个回答 2016-12-23

因素很多~是不是忘加东西啦~模板浓度会不会太浓或者不够啊,是不是需要纯化啊~退火温度合不合适啊~是不是要换酶啊~mg离子浓度啊~具体问题具体分析~先跑个温度梯度吧~

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PCR扩增总是得不到目的条带,可能有哪些原因,实验已经做了一个月了,望...答：可能模板有问题,可能是模板浓度过高或者循环次数过多所导致；或可能是退火温度不适合，最后就考虑一下引物问题

为什么做pcr结果只有引物二聚体而没有目的条带呢?答：引物二聚体的产生原因是引物的3'端间相互错配扩增形成，只有引物二聚体没有目的扩增产物原因有以下几点:1）主要需要优化引物设计，使用专业设计软件检查，避免引起二聚体的序列。适当延长引物，可提高引物与模板的结合效率，提高特异性。2）优化反应体系：适当提高退火温度可以有效提高特异性。另外减少循环数...

PCR跑不出条带答：回答：PCR没有产物的原因可能有: 1)引物参数及引物和模板的匹配; 2)模板的质量,可以用其他引物作为阳性对照; 3)反应条件; 4)酶失活; 5)电泳条件; 根据你的说法,引物和PCR条件应该是没有问题的,那么没有条带,是完全是黑的还是很弥散拖着的呢?你应该考虑一下酶是否失活的问题,或者是胶的浓度合不...

PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么答：1，可能是模板量过高，降低模板浓度10-1000倍；2，适当提高退火温度1-3度，或者先用高于你以往退火温度的1-3度先p上5个循环，再用先前温度p剩余的循环（也就是在程序中多设置2步）；3，稍降Mg离子浓度，如果以前加1.5ul的，试试1-1.2ul；如果以上方案还不能解决，就要检查你的模板、引物和...

我做的pcr跑完胶完全没条带怎么回事?就好像没加DNA似的答：非特异性扩增产物。应该优化PCR反应，比如提高退火温度（首选）、减少酶量（首选）、降低镁离子浓度、降低模板浓度、降低引物浓度等等。如果不行，还可以重新设计引物，增强引物的特异性。

筛选引物PCR扩增后变性聚丙烯酰胺跑不出条带,或条带模糊,是怎么回事...答：如果MARKER跑的出来很清晰，就不是胶的问题，我今天也碰到这个问题，有可能是引物不好，有可能体系不好，也有可能是天气原因，天气变化有可能显影需要的时间也不一样，如果体系，引物你都确定没有问题，就延长显影时间。

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