什么是生物分离?与化学分离相比有何特点?

如题所述

第1个回答  2022-10-19
分类: 教育/科学 >> 科学技术 >> 工程技术科学
问题描述:

与化学分离相比有何特点?

解析:

生物分离的基本概念

生物分离是从生物材料、微生物的发酵液、生物反应液或动植物细胞的培养液中分离并纯化有关产品(如具有药理活性作用的蛋白质等)的过程,又称为下游加工过程。

生物分离过程的主要特点

n 常无固定操作方法可循

生物材料组成非常复杂

n 分离操作步骤多,不易获得高收率

培养液(或发酵液)中所含目的物浓度很低,而杂质含量却很高

n 分离进程必须保护化合物的生理活性

生物活性成分离开生物体后,易变性、破坏

n 基因工程产品,一般要求在密封环境下操作。

生物分离的一般工艺流程

发酵液→预处理→细胞分离→( 细胞破碎→细胞碎片分离 )



→初步纯化→高度纯化→成品加工

注:(1)胞内产物需经细胞破碎,细胞碎片分离等步骤;胞外产物则将细胞去除后,对余下的液体即可进行初步纯化。

(2)在初步纯化及其以前的各步操作,处理的体积较大,着重于浓缩,称为提取或分离;以后各步为精细的分离操作,着重于纯化,称为精制(或纯化)。

生物分离的各阶段的常用方法

(1)发酵液的预处理

n 加热

n 调pH

n 絮凝和凝聚

(2 )固液分离

n 沉降

n 离心分离

n 过滤

n 错流过滤

(3)细胞破碎

n 机械法

高压匀浆、高速珠磨、

超声波破碎

n 非机械法

化学法、酶解法、渗透压冲击法、冻结融化法、干燥法

(4 )初步纯化

n 沉淀法

n 吸附法

n 萃取法

n 超滤法

(5)高度纯化

n 层析

亲和层析、凝胶层析、离子交换层析

n 电泳

n 结晶和重结晶

(6 )成品加工

n 无菌过滤

n 去热原

n 干燥

冷冻干燥、喷雾干燥

n 制剂

生物分离方法的选择依据

n 传统生物药物(抗生素)

根据具体条件,通过小实验决定,选择时应考虑两个因素。

(1)抗生素的理化性质:极性、酸碱性、溶解度等,了解其理化性质,通常利用纸层析和纸电泳的方法。

(2)抗生素的稳定性:要了解它在什么样的pH和温度范围易受破坏。

纸层析

抗生素在某一种溶剂中的Rf值大,表明它在该种溶剂中溶解度大;相反,如Rf值小,则溶解度小。如Rf为零,则说明不能溶解。如抗生素在极性强的溶剂中有较大的Rf值,则表明该抗生素是极性化合物;而非极性抗生素在非极性溶剂中Rf值较大,在极性溶剂中Rf值较小。

纸电泳

通过纸层析判断为水溶性的抗生素,可用纸电泳法进一步判断其电离性质。

电泳结果与样品性质的判断见课本第六页表1-1。

生物分离方法的选择依据

n 基因工程药物

应根据目标蛋白和杂蛋白在物理、化学和生物化学方面性质的差异,如,生物特异性、分子量、等电点值和稳定性等。当几种方法联用时,最好以不同的分离机理为基础,且前一种方法处理过的液体应能适于后一种方法的料液。
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