重组质粒除了目的基因

Question

如图是转基因抗虫棉的培育过程，请分析回答下列问题： （1）过程①需要的工具酶有___，该过程形成的重组质粒除了含有目的基因和标记基因外，还含有___． （2）如果重组质粒上的标记基因是氨苄青霉素抗性基因，请说明筛选含有重组质粒的棉花细胞的方法（不考虑棉花细胞中只导入普通质粒的情况）：___． （3）过程②是将重组质粒导入棉花细胞，常用的方法是___，在个体生物学水平上检测抗虫基因是否表达的方法是___． （4）过程③④是___技术的两个步骤，该技术所利用的原理是___．

Answer 1

（1）过程①是基因表达载体的构建，需要使用限制酶和DNA连接酶，基因表达载体上含有目的基因、启动子、终止子和标记基因．
（2）氨苄青霉素抗性基因使受体细胞具有抵抗氨苄青霉素的特性，因此，可以用含有氨苄青霉素的培养基来培养棉花细胞，在该培养基上能生长的细胞即含有重组质粒．
（3）将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法．
（4）过程③④分别是脱分化和再分化，属于植物组织培养的两个步骤，植物组织培养所利用的原理是植物细胞的全能性．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶 启动子和终止子
（2）将棉花细胞接种在含有氨苄青霉素的（完全）培养基上，在该培养基上能生长的棉花细胞即含有重组质粒
（3）农杆菌转化法 对棉花植株做抗虫的接种实验
（4）植物组织培养 植物细胞的全能性