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影响质粒DNA提取纯度的原因?
如题所述
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第1个回答 2022-07-09
据我自己的经验,这种情况往往是由于操作不当引起,可能有如下原因:
1,菌体量可能过大,裂解不充分,或裂解液与中和液比例不适当;(调整菌液量或缓冲液量)
2,混合时过于剧烈,可能会带来基因组DNA片段的污染;(轻柔混合)
3,Rnase失活,可能带来RNA污染;(换Rnase)
4,离心不充分(有絮状物在上层),或在离心后吸取上清时,将沉淀吸入,会带来蛋白质污染.(加大离心时间及转速,操作时避免吸入沉淀或表面絮状物)
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纯度
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影响
本实验结果的因素有哪些
质粒dna
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答:
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1、质粒DNA来源:不同细菌资源的质粒DNA在提取和纯化过程中可能存在差异,这会直接影响制备结果
。2、
细胞密度
:高细胞密度可能会影响质粒DNA的产量和纯度,因为这可能导致DNA的降解、损伤或剪切。3、溶液pH值:溶液pH值对质粒DNA的稳定性和溶解性有很大影响,其选取应根据实验所需而定...
碱裂解法中
影响质粒提取的
因素有哪些
答:
菌群体积,碱裂解液的pH值等。
1、菌群体积:菌量越多,则质粒的提取量就越多
。2、碱裂解液的pH值:碱性过强会影响DNA的纯度,而过弱则会影响碱裂解效果。pH值在12左右,效果较好。
影响
最终基因组
DNA纯度的
因素主要有哪些?
答:
手提的话需要质粒提取因素就很多了,这里有总结的很好的你可以看一下:
1、手提中主要是试剂对质粒DNA提取的影响较大
,其中溶液Ⅰ,加入的葡萄糖可以使悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子底部。EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属离子的螯合剂,可以抑制DNase的活性和微生物生长。此步骤菌体一定要悬浮均匀,不...
质粒dna提取
中,什么
原因
会导致质
答:
2.固定间
DNA影响
固定程所发组织反应至今尚未完全理解,虽理论讲室温福尔马林与DNA几乎发,已发现碱基与组蛋白间甲基交联.3.固定温度等其素DNA影响核酸与固定剂反应由反应、浓度、酸硷度及温度等素调节,其温度效应显特别重要.4.组织处理程DNA影响我发现,规组织处理蜡块
提取DNA
,其部量晨100bp-10000bp间...
质粒提取
失败
的原因
答:
以常见的试剂盒
提取
为例:1.菌的活性:如果菌种过久或保存不当,
质粒
拷贝数可能会很低,
影响
最终的浓度;2.基因组
DNA
污染:在碱裂解时,如果溶液配制或体积不对,或剧烈震荡,会带入基因组
dna
;3,蛋白污染:碱裂解后,需高速离心,如果时间或转速不够,蛋白没有完全沉降,或吸取上清时混入沉淀,会带来...
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