自行车上路交通规则如下：
1、自行车与机动车一样实行右侧通行。在道路划分有机动车道、非机动车道和人行道的情况下，机动车、非机动车、行人应当各行其道。
2、有自行车道的，应当在自行车道内行驶。
3、没有自行车道的，应当靠行车道的右侧（距离右边1.5米内）行驶。
4、有自行车道但被占用无法通行的，可借用相邻的机动车道通行，并在驶过被占用路段后迅速驶回自行车道。
5、自行车不得进入高速公路行驶。
市区道路，左边为机动车主道，中间为机动车辅道，右边为行人、非机动车道。行人/非机动车道上，左边为非机动车道，右边为行人道。混合道——机动车、非机动车、行人均有路权，一般的大型立交桥下都设有混合道。
依据《中华人民共和国道路交通安全法实施条例》第七十条，驾驶自行车、电动自行车、三轮车在路段上横过机动车道，应当下车推行，有人行横道或者行人过街设施的，应当从人行横道或者行人过街设施通过；没有人行横道、没有行人过街设施或者不便使用行人过街设施的，在确认安全后直行通过。
因非机动车道被占用无法在本车道内行驶的非机动车，可以在受阻的路段借用相邻的机动车道行驶，并在驶过被占用路段后迅速驶回非机动车道。机动车遇此情况应当减速让行。
第七十一条，非机动车载物，应当遵守下列规定：
(一)自行车、电动自行车、残疾人机动轮椅车载物，高度从地面起不得超过1.5米，宽度左右各不得超出车把0.15米，长度前端不得超出车轮，后端不得超出车身0.3米；
(二)三轮车、人力车载物，高度从地面起不得超过2米，宽度左右各不得超出车身0.2米，长度不得超出车身1米；
(三)畜力车载物，高度从地面起不得超过2.5米，宽度左右各不得超出车身0.2米，长度前端不得超出车辕，后端不得超出车身1米。
自行车载人的规定，由省、自治区、直辖市人民政府根据当地实际情况制定。
第七十二条，在道路上驾驶自行车、三轮车、电动自行车、残疾人机动轮椅车应当遵守下列规定：
(一)驾驶自行车、三轮车必须年满12周岁；
(二)驾驶电动自行车和残疾人机动轮椅车必须年满16周岁；
(三)不得醉酒驾驶；
(四)转弯前应当减速慢行，伸手示意，不得突然猛拐，超越前车时不得妨碍被超越的车辆行驶；
(五)不得牵引、攀扶车辆或者被其他车辆牵引，不得双手离把或者手中持物；
(六)不得扶身并行、互相追逐或者曲折竞驶；
(七)不得在道路上骑独轮自行车或者2人以上骑行的自行车；
(八)非下肢残疾的人不得驾驶残疾人机动轮椅车；
(九)自行车、三轮车不得加装动力装置；
(十)不得在道路上学习驾驶非机动车。