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质粒dna的提取与细菌基因组dna的提取实验的区别在哪儿
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第1个回答 2020-01-28
质粒dna提取一般用沸水浴法和碱裂解法,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用。它主要是将细胞内的环状质粒提取出来,一般需要用sds裂解,rna酶降解,然后过柱,再进行洗脱.过程比较简单。
而基因组dna提取则较为复杂,也需要用sds裂解和rnd酶降解,但降解时间较长,同时对有些革兰氏阳性细菌还要进行溶菌酶处理,最后用氯仿-苯酚进行除蛋白,这一步重复进行多次,在用氯仿除去多余的苯酚,用乙醇清洗烘干后溶于te缓冲液中。整个过程比提质粒更复杂,耗时也更长。
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大肠杆菌
基因组DNA提取和质粒DNA提取的
异同点
答:
质粒提取过程中,有一个DNA变性、复性的过程,这个与基因组提取完全不同
,这是利用质粒是以超螺旋结构存在于大肠杆菌中的特殊状态,分离纯化质粒时总是会利用这个特点来分离基因组DNA与质粒DNA.
基因组提取 和DNA的提取
有什么不一样额?
答:
差别就是,
质粒是环状的
,可以通过碱变性,酸变性再用氯仿等与基因组和蛋白分离出来。而基因组不能经过酸碱变性复性,因为会解链合不上,
细菌基因组DNA提取与质粒DNA提取的
异同点
答:
原理相同,再利用
质粒与基因组DNA的
变性情况不一样加以分离。
大肠杆菌
基因组DNA提取和质粒DNA提取的
异同点?
答:
提取的步骤基本上都属
DNA的提取
步骤,包括细胞裂解,DNA释放,纯化,最后沉淀溶解。
质粒提取
过程中,有一个DNA变性、复性的过程,这个与基因组提取完全不同,这是利用质粒是以超螺旋结构存在于大肠杆菌中的特殊状态,分离纯化质粒时总是会利用这个特点来分离
基因组DNA与质粒DNA
。
分离
基因组DNA和质粒DNA
有哪些不同之处???
答:
上清的
质粒
用乙醇沉淀,这样得到的质粒基本没有基因组。而分离基因组时,一般也是用SDS裂解(想对于碱裂解,SDS比较温和)。同时还用蛋白酶K处理,将基因组上的蛋白降解掉,这样就得到了
基因组DNA
。再用乙醇沉淀,去掉其他的东东。如果菌中含有质粒,质粒也一起提出来,无法去掉。至于后来的试剂盒,如...
质粒DNA提取和
细胞
基因组DNA提取的
异同
答:
质粒dna提取
一般用沸水浴法和碱裂解法,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用,它主要是将细胞内的环状
质粒提取
出来,一般需要用sds裂解,rna酶降解,然后过柱,再进行洗脱。过程比较简单。而
基因组dna提取
则较为复杂,也需要用sds裂解和rnd酶降解,但降解时间较长,同时对有些革兰氏阳性
细菌
还要进行...
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