低丰度蛋白分离与鉴定

低丰度蛋白分离与鉴定,要解决方案

第1个回答  2014-01-03
LC/MSn分析为鉴定复杂混合物中的蛋白质提供了强有力的手段。安捷伦的蛋白质组学解决方案(内流蛋白组学解决方案(Nanoflow Proteomics Solution))将先进的纳流HPLC和离子阱MSn完美地结合以来,开创了分离和鉴定低浓度蛋白质的快速解决方案。

卓越的分离效率…
纳流LC系统随机提供用于样品净化、浓缩和分离的高效纳流色谱柱。仪器配置可以是一维分离、一维分离带样品净化和浓缩,或者完全的二维分离一无论何种配置都适合您的样品分析要求。
如果分析包括人血浆、血清或脑脊髓液流体,安捷伦的多种亲和净化体系能够加入到蛋白质组学解决方案(Nanoflow Proteomics Solution )。这些专利技术色谱柱和缓冲液能够清除样品中98-99%的清蛋白、IgG、IgA、触珠蛋白、转铁蛋白和抗胰岛素。
纳流蛋白质组学解决方案体现了最先进的LC技术。当流速为100nI/mm到1μl/mm时,独一无二的电子流量控制(EFC)系统为前所未有的稳定性和可靠性提供了主动反馈。整个流路设计可以使分离效率最大化并保持不变。

…超高灵敏度的分析…
纳流蛋白质组学解决方案的核心是安捷伦最新最灵敏的离子阱质谱仪,该仪器配备有改进的、第二代纳流喷雾离子源。该质谱仪提供阿托摩尔(attomole)级的灵敏度,并将扫描速度与分辨率完美组合。其专业化的多肽扫描模式增强了对低丰度蛋白质的分析。

…和鉴定的准确性
我们提供的SpectrumMill MS蛋白组学数据分析平台为蛋白质鉴定提供多个选项,包括MS和MS/MS数据库搜索,以及de novo测序。通过智能化谱图提取和处理,Spectrum Mill MS工作台可以加速检索,并减少假阳性匹配数量。基于信息内容而非或然性的匹配排序与被检索的数据库无关,从而使得交叉数据库比较成为可能。

免疫亲和色谱柱除去高丰度蛋白质
在生物样品中,常见的高丰度蛋白质经常掩盖 实际感兴趣进行分析的低丰度蛋白质。安捷伦 的多种亲和净化体系采用免疫亲和LC色谱柱 和专利技术的优化缓冲液,能够从人体血浆、 血清或脑脊髓液流体(CSF)中清除98-99%的6
种高丰度蛋白质(清蛋白、IgG、IgA、触珠蛋 白、转铁蛋白和抗胰岛素),从而使样品几乎不 含有这些干扰物,可以使用LC/MS或凝胶电泳 做进一步研究。该系统的特征为:
·高效
·低的非特异性蛋白质结合,从而最大限度地减少了重要蛋白质的损失
·长的柱寿命(正确操作条件下最少200次进样)
·与几乎所有的HPLC系统兼容

高效色谱柱提供优化的分离
安捷伦提供专为纳流蛋白质组学解决方案的应用而设计的分析柱和富集柱。这些色谱柱非常适合于多肽消解产物的高灵敏度、高通量分离。
分析柱
纳流蛋白质组学解决方案(纳流蛋白质组学解决方案包括75pm内径、50或150mm长度的C18或C8内流柱,这些色谱柱充分体现了安捷伦著名的ZORBAX StableBond(即SB)技术。这些反相HPLC柱特别稳定和耐用,是多肽分离的理想色谱柱。其特点包括:
涂敷PEEK材料的熔融石英
·标准1/16英寸接头
·直接连接到MS的灵活性
·流速范围100nl/mm,1μl/mm
还有内径为100μm的同类色谱柱,用于需要较高流速的应用。
富集柱
纳流蛋白质组学解决方案还包括ZORBAX 300SBCl8和C8富集柱(0.3x 5mm)。这些富集柱可出色地完成低浓度多肽混合物韵浓缩和脱盐。还有可以组成完全两维LC分离体系的离子交换色谱柱。
相似回答