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荧光素酶报告基因步骤
荧光素酶
的应用
答:
法医可以用含有萤光
素酶
的溶液来检测犯罪现场中残留的血迹。医院用萤光素酶的发光来发现特定的疾病。萤光素酶还可以作为“报告蛋白”被用于分子生物学研究中,例如,用于在转染过萤光素酶的细胞中检测特定启动子的转录情况或用于探测细胞内的ATP的水平;这一技术被称为
报告基因
检测法或萤光素酶检测法(...
什么是
报告基因
检测法?
答:
转基因植物常用的
报告基因
主要有β-葡萄糖醛酸乙酰转移酶(β-glucuronidase)基因emphasis:role=italicgusemphasis、胭脂碱合成酶(nopaline:synthase)基因emphasis:role=italicnosemphasis、章鱼碱合成酶(octopine:synthase)基因emphasis:role=italicocsemphasis、
荧光素酶
(luciferase)基因emphasis:role=...
荧光素酶
活性实验找哪家
答:
荧光素酶报告基因
检测:原理、应用与解决方案在生物科学研究中,报告基因作为一种关键工具,通过其编码产物的可检测特性,为我们评估目的基因功能提供有力支持。其中,荧光素酶(Luciferase)以其卓越的特性脱颖而出,如高灵敏度、低内源干扰等,被广泛应用在生物活性检测领域。萤火虫荧光素酶的奥秘萤火虫荧光...
哪位同学可以介绍下Luciferase原理
答:
Luciferase
报告基因
系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫
荧光素酶
(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放...
做luciferase需要注意些什么
答:
样品和测定试剂混合后,必须等待1-2秒,再进行测定。测定时间通常为10秒,根据情况也可以测定更长或更短时间,但是同一批样品最好使用相同的测定时间。为避免由于质粒转细胞时效率的差异而带来的误差,可以同时转入Renilla荧光素酶的报告基因质粒作为内参,采用双
荧光素酶报告基因
检测试剂盒进行检测;也可以...
报告基因
列举几种常见的报告基因
答:
β半乳糖苷酶是另一种常用
报告基因
,编码于大肠杆菌的lacZ基因,其易于通过免疫组织化学观察。使用ONPG或CPRG底物检测其酶活性,ONPG灵敏度较低,而CPRG更高。
荧光素酶
,如细菌荧光素酶、萤火虫荧光素酶和Renilla荧光素酶,因其非放射性和高效性,尤其适合哺乳细胞研究。Promega的pGL3载体提供了分析转录活性...
分子
荧光
互补技术能验证转录因子互作吗
答:
转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子,也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合,这些特异性的序列被称为顺式作用元件,转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合,从而对基因的表达起抑制或增强的作用。
荧光素酶报告基因
实验(luciferase assay)是...
哪位同学可以介绍下Luciferase 原理
答:
自1986— 1987 年首次被当作
报告基因
使用以来,
荧光素酶
基因已成为目前运用最广泛的报告基因之一。尽管来自不同物种的荧光素酶及底物存在有很大的差异,但有一个共同点,即在生物发光反应体系中均需发生氧化反应。它通过两个
步骤
使底物荧光素发生氧化作用,而产生发光反应,此反应是ATP 依赖性的。杂环荧光...
如何利用GUS
报告基因
检测所需基因
答:
作为
报告基因
,在遗传选择和筛选检测方面必须具有以下几个条件:(1)已被克隆和全序列已测定;(2)表达产物在受体细胞中不存在,即无背景,在被转染的细胞中无相似的内源性表达产物;(3)其表达产物能进行定量测定。目前常用的报告基因有氯霉素乙酰转移
酶基因
(cat)、
荧光素酶
基因(luc)、β-葡萄糖苷酸酶...
哪位同学可以介绍下Luciferase原理
答:
可对
荧光素酶报告基因
的转录进行间接估计.荧光素酶易被蛋白酶降解,在转染的哺乳动物细胞中的半衰期约为3 小时.荧光素酶报告系统为启动子活性的检测提供了一个敏感、快速、非放射性的检测方法.荧光素酶报告基因检测试剂盒(Luciferase Reporter Gene Assay Kit),是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光...
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